Apa antibodi dalam darah - varietas dan indikasi untuk analisis, norma dan penyebab penyimpangan

Ujian makmal diperlukan untuk membuat diagnosis yang tepat, membantu doktor menentukan keparahan penyakit, tahap kerosakan pada organ dalaman, dan memilih rejimen rawatan terbaik. Ujian darah untuk antibodi adalah wajib bagi wanita hamil dan pesakit yang mengalami gangguan sistem imun, pembiakan atau genitouriner, kelenjar tiroid.

Varieti antibodi

Dalam jangka masa hidup yang berbeza, tubuh manusia "berkenalan" dengan pelbagai patogen, bahan kimia (bahan kimia rumah tangga, ubat-ubatan), produk pemecahan selnya sendiri (contohnya, dengan luka, keradangan, luka kulit bernanah). Sebagai tindak balas kepada ini, dia mula menghasilkan imunoglobulin sendiri atau antibodi dalam darah - ini adalah sebatian protein khas yang terbentuk dari limfosit dan bertindak sebagai perangsang imun.

Di makmal imunologi, lima jenis antibodi diasingkan, masing-masing bertindak tegas pada antigen tertentu:

  • IgM adalah imunoglobulin pertama yang mula dihasilkan apabila jangkitan memasuki badan. Peranannya adalah untuk meningkatkan kekebalan terhadap memerangi penyakit utama.
  • IgG - muncul 3-5 hari selepas bermulanya penyakit. Ini membentuk imuniti yang stabil terhadap jangkitan, bertanggungjawab terhadap keberkesanan vaksinasi. Kelas sebatian protein ini sangat kecil sehingga dapat menembusi penghalang plasenta, membentuk kekebalan utama janin..
  • IgA - melindungi saluran gastrointestinal, sistem kencing dan saluran pernafasan daripada virus, bakteria, kuman. Mereka mengikat benda-benda asing, tidak membiarkannya mendapatkan pijakan di dinding selaput lendir.
  • IgE - diaktifkan untuk melindungi tubuh daripada parasit, kulat dan alergen. Mereka dilokalisasi terutamanya pada bronkus, kulit submukosa, usus dan perut. Ikut serta dalam pembentukan imuniti sekunder. Dalam bentuk bebas dalam plasma darah praktikal tidak ada.
  • IgD adalah pecahan yang tidak dikaji sepenuhnya. Adalah dipercayai bahawa agen ini bertanggungjawab untuk pembentukan imuniti tempatan, mereka mula dihasilkan semasa pemburukan jangkitan kronik atau myeloma. Kurang daripada 1% pecahan semua imunoglobulin dalam serum.

Kesemuanya boleh berada di plasma darah secara bebas dan melekat pada permukaan sel yang dijangkiti. Mengenali antigen, protein tertentu mengikatnya menggunakan ekor. Ia berfungsi sebagai sejenis isyarat untuk sel imun khusus yang bertanggungjawab untuk meneutralkan objek asing. Bergantung pada bagaimana protein berinteraksi dengan antigen, mereka dibahagikan kepada beberapa jenis:

  • Anti-berjangkit atau anti-parasit - mengikat pada badan mikroorganisma patogen, menyebabkan kematian mereka.
  • Antitoksik - tidak mempengaruhi aktiviti penting badan asing, tetapi meneutralkan toksin yang dihasilkannya.
  • Autoantibodi - mencetuskan perkembangan gangguan autoimun dengan menyerang sel-sel badan tuan rumah yang sihat.
  • Alloreactive - imunoglobulin yang menentang antigen tisu dan sel organisma lain dari spesies biologi yang sama. Analisis untuk menentukan antibodi pecahan ini dilakukan semasa pemindahan (transplantasi) buah pinggang, hati, sumsum tulang.
  • Isoantibodi - sebatian protein khusus dihasilkan terhadap agen sel spesies biologi lain. Kehadiran antibodi dalam darah menjadikan mustahil untuk memindahkan organ antara spesies yang serupa secara evolusi dan imunologi (contohnya, pemindahan jantung dari simpanse ke manusia).
  • Antiidiotipik - sebatian protein yang direka untuk meneutralkan kelebihan antibodi mereka sendiri. Sebagai tambahan, pecahan imunoglobulin ini mengingati struktur struktur sel-sel patogen yang melawan antibodi asalnya, dan menghasilkannya semula apabila agen asing memasuki semula darah.

Ujian darah untuk antibodi

Kaedah moden diagnosis makmal pelbagai penyakit adalah kajian ELISA darah (analisis imunofluoresensi). Ujian antibodi ini membantu menentukan titer (aktiviti) imunoglobulin, kelasnya dan menentukan tahap perkembangan proses patologi. Kaedah penyelidikan terdiri daripada beberapa peringkat:

  1. Sebagai permulaan, pembantu makmal menerima sampel cecair biologi dari pesakit - serum darah.
  2. Sampel yang dihasilkan diletakkan di atas piring plastik khas dengan sumur yang sudah mengandung antigen yang disucikan dari patogen atau protein yang diinginkan (sekiranya antigen perlu ditentukan).
  3. Pewarna khas ditambahkan ke dalam sumur, yang, sekiranya berlaku reaksi enzim positif, mengotorkan kompleks imun.
  4. Mengikut ketumpatan pewarnaan, pembantu makmal membuat kesimpulan mengenai hasil analisis.

Penyelidik memerlukan satu hingga tiga hari untuk menyelesaikan ujian ini. Kajian itu sendiri terdiri daripada dua jenis: kualitatif dan kuantitatif. Dalam kes pertama, difahami bahawa antigen yang diinginkan akan dijumpai atau, sebaliknya, dalam sampel darah. Ujian kuantitatif mempunyai reaksi berantai yang lebih kompleks dan membantu membuat kesimpulan mengenai kepekatan antibodi dalam darah pesakit, menetapkan kelasnya, menilai seberapa cepat proses jangkitan berkembang.

Mengapa perlu menjalani ujian antibodi

Ujian ELISA dijalankan dalam pelbagai situasi. Sebagai contoh, dalam beberapa tahun terakhir, teknik ini telah digunakan secara aktif dalam perubatan eksperimental untuk mengembangkan ubat baru dan dalam ujian klinikal. Analisis mengenai kehadiran antibodi dalam darah mesti diresepkan sebelum atau semasa kehamilan untuk mengenal pasti sebatian protein yang aktif melawan jangkitan TORCH (penyakit yang ditularkan dalam rahim dari ibu ke anak):

  • toksoplasmosis;
  • rubela;
  • jangkitan sitomegalovirus;
  • virus herpes.

Hasil ujian membantu menentukan keberkesanan kaedah rawatan yang dipilih, menentukan jenis virus, aktivitinya. Dalam amalan klinikal, ujian ELISA ditetapkan untuk petunjuk berikut:

  • Diagnosis penyakit kelamin (PMS). Ini termasuk: klamidia, ureaplasmosis, mycoplasmosis, trichomoniasis, sifilis.
  • Penentuan patologi kelenjar tiroid atau kelenjar endokrin lain.
  • Diagnosis jangkitan hepatitis C, B, D, A, E, AIDS atau HIV.
  • Penentuan alergen atau sebatian yang menyebabkan keracunan sekiranya keracunan, ular atau gigitan serangga.
  • Penentuan jenis diabetes mellitus, ketahanan tisu terhadap insulin.
  • Rawatan kemandulan. Kehadiran antibodi anti-sperma atau anti-ovari dalam darah menjadi sebab kemustahilan konsepsi produktif.
  • Diagnosis penyakit berjangkit yang disebarkan melalui hubungan, saluran udara atau fecal-oral - pencerobohan helminthik, difteria, tetanus, leptospirosis (penyakit yang dicirikan oleh kerosakan pada kapilari ginjal dan hati), campak, cacar air.
  • Diagnosis atau rawatan barah, penyakit sumsum tulang.

Cara lulus

Bergantung pada gaya hidup, jenis pemakanan, keadaan psiko-emosi, komposisi darah mana-mana orang sentiasa berubah, oleh itu, sebelum permulaan kajian, rejim tertentu mesti diperhatikan. Persiapan mengambil masa 2-3 hari dan memerlukan pematuhan dengan peraturan berikut:

  • Adalah perlu untuk menderma darah untuk antibodi dari urat pada waktu pagi dan selalu pada waktu perut kosong. Pagar dikendalikan oleh pakar dengan alat steril di hospital.
  • Untuk mendapatkan hasil yang paling tepat, perlu mengecualikan makanan salai, pedas, masin dan goreng dari diet harian 2 hari sebelum penghantaran bahan biologi. Untuk jangka masa yang sama, disarankan untuk berhenti merokok sepenuhnya, minum minuman beralkohol atau ubat-ubatan yang mengandungi alkohol, jus buah.
  • Sekiranya analisis ditetapkan oleh doktor untuk menentukan jenis penyakit kelamin, mendiagnosis pencerobohan helminthik, hepatitis atau rubella, beberapa hari harus beralih ke diet susu.
  • Anda tidak boleh menghantar bahan untuk penyelidikan setelah kejutan emosi baru-baru ini, menjalani fluorografi, ultrasound, pencitraan resonans magnetik, fisioterapi.

Menyahkod ujian darah untuk antibodi

Dalam rancangan diagnostik, hanya tiga jenis imunoglobulin yang signifikan: IgM, IgG, IgA. Dengan penyimpangan mereka dari norma, seseorang dapat menilai adanya atau ketiadaan jangkitan. Hasil negatif dari analisis bukanlah petunjuk mutlak bahawa proses menular tidak ada. Ini disebabkan oleh kenyataan bahawa selepas jangkitan, pembentukan imuniti reaksi berantai memerlukan sedikit masa - dari 2-3 hari hingga 2-3 minggu. Untuk mengesahkan keputusan negatif, ujian ELISA mesti diulang setelah beberapa waktu..

Kehadiran antibodi lebih kerap menunjukkan bahawa alergen, virus, bakteria atau mikroorganisma lain terdapat di dalam darah. Lebih-lebih lagi, walaupun keputusan positif tidak selalu dianggap sebagai patologi. Sebagai contoh, dengan menghasilkan imunoglobulin tambahan, tubuh dapat bertindak balas terhadap rawatan, konsepsi, dan pemindahan organ yang dipilih dengan tidak betul. Secara umum, hasil kajian membantu menjawab soalan berikut:

  • sejauh mana sistem imun bertindak balas terhadap jangkitan, adakah perlu mengambil langkah rawatan tambahan;
  • pada tahap perkembangan penyakit ini;
  • Adakah orang itu mempunyai penyakit onkologi;
  • bagaimana proses survival implan berlaku;
  • bahan apa yang menyebabkan perkembangan alahan;
  • sama ada jangkitan dengan virus, parasit, bakteria telah berlaku dan berapa lama;
  • adakah penyakit kronik bertambah buruk.

Imunoglobulin Kelas A adalah salah satu yang penting untuk diagnosis pembezaan. Ia selalu terdapat di dalam badan dan menyumbang kira-kira 10-25% daripada semua pecahan imunoglobulin. Nilai rujukan IgA mungkin berbeza-beza bergantung pada usia dan jantina:

Ujian darah untuk antibodi - jenis (ELISA, RIA, imunobloting, kaedah serologi), norma, penyahkodan hasil. Di mana saya boleh masuk? Harga kajian.

Laman web ini memberikan maklumat rujukan untuk tujuan maklumat sahaja. Diagnosis dan rawatan penyakit harus dilakukan di bawah pengawasan pakar. Semua ubat mempunyai kontraindikasi. Perundingan pakar diperlukan!

Ujian darah untuk antibodi bermaksud nama kolektif sejumlah kaedah diagnostik makmal yang dirancang untuk menentukan pelbagai bahan dan mikroorganisma dalam darah dengan adanya antibodi terhadap struktur biologi yang dapat dikesan ini.

Ujian darah untuk antibodi - maklumat umum

Apa yang ditunjukkan oleh ujian darah untuk antibodi??

Untuk memahami maksud istilah "ujian darah untuk antibodi", anda perlu mengetahui apa itu antibodi, melawan apa dan siapa mereka, dan bagaimana ia digunakan dalam kaedah makmal.

Jadi, antibodi adalah protein yang dihasilkan oleh sel-sel sistem imun (B-limfosit) terhadap mana-mana mikroba yang memasuki tubuh, atau terhadap molekul biokimia. Antibodi yang dihasilkan oleh sel imun dirancang untuk membunuh mikroorganisma atau sebatian biokimia yang mana ia disintesis. Dengan kata lain, apabila sel-sel imun mensintesis sejumlah antibodi yang mencukupi, yang terakhir muncul dalam peredaran sistemik dan memulakan pemusnahan sistematik mikroba atau molekul biologi yang memasuki tubuh manusia dan menyebabkan pelbagai penyakit.

Sel-sel imun menghasilkan antibodi khusus yang berfungsi dan memusnahkan hanya jenis mikrob atau biomolekul yang ditentukan sebelumnya yang dikenali oleh sistem imun sebagai asing. Secara skematik, ini berlaku seperti berikut: sebarang mikroorganisma patogen atau molekul biologi memasuki badan. Sel sistem kekebalan tubuh "duduk" pada sebatian atau mikroba ini, yang, sebagaimana adanya, "membaca" ciri-cirinya (protein reseptor hadir di permukaan), iaitu "mengenal". Selanjutnya, sel imun yang memediasi menyebarkan "maklumat yang dibaca" ke limfosit melalui rangkaian reaksi biokimia yang kompleks. Limfosit yang menerima "maklumat" diaktifkan - mereka nampaknya telah menerima "tugas" tersebut. Dan setelah pengaktifan, limfosit mula mensintesis antibodi yang mengandungi reseptor yang membolehkan mereka "mengenali" dan melekat pada permukaan hanya mikroba atau molekul yang "ciri "nya ditularkan oleh sel perantara. Hasilnya adalah antibodi spesifik yang secara efektif menghancurkan mikrob dan biomolekul patogenik yang "dikenali" secara eksklusif.

Antibodi spesifik seperti itu selalu dihasilkan di dalam badan apabila mikroorganisma patogen masuk ke dalamnya - bakteria, virus, protozoa, helminth, dll. Antibodi juga dapat disintesis untuk memusnahkan molekul biologi yang telah dikenali oleh sistem imun sebagai "asing." Sebagai contoh, apabila kumpulan darah yang lain memasuki badan, sistem kekebalan tubuh mengakui sel darah merahnya sebagai "asing", menghantar isyarat ke limfosit, yang menghasilkan antibodi, yang seterusnya memusnahkan sel darah merah asing. Oleh kerana itu, reaksi host berbanding transplantasi berkembang..

Tetapi selalu sistem imun menghasilkan antibodi yang bertindak tegas terhadap mikroba atau biomolekul tertentu, dan bukan terhadap semua orang yang "kelihatan" seperti mereka. Kerana kekhususan dan selektiviti ini, antibodi tidak memusnahkan sel dan biomolekul yang diperlukan, dan hanya yang diakui oleh sistem imun sebagai "asing" dan berbahaya diserang.

Antibodi dalam bahasa biokimia disebut imunoglobulin, dan ditentukan oleh singkatan Ig. Pada masa ini, terdapat lima kelas imunoglobulin yang dapat disintesis oleh B-limfosit - ini adalah imunoglobulin A (IgA), imunoglobulin G (IgG), imunoglobulin M (IgM), imunoglobulin E (IgE) dan imunoglobulin D (IgD). Setiap kelas imunoglobulin mempunyai kekhususan yang dinyatakan di atas berkenaan dengan mikrob atau biomolekul yang dimusnahkan olehnya. Tetapi setiap kelas imunoglobulin mempunyai, "depan" sendiri di mana mereka bertindak.

Oleh itu, imunoglobulin A terletak terutamanya pada selaput lendir, dan memastikan pemusnahan mikrob patogen pada mulut, hidung, nasofaring, uretra, dan vagina. Immunoglobulin M dihasilkan pertama kali apabila mikroba memasuki aliran darah, dan oleh itu dianggap bertanggungjawab untuk proses keradangan akut. Immunoglobulin G, sebaliknya, dihasilkan dengan lebih perlahan, tetapi untuk waktu yang lama mereka beredar di dalam darah dan memastikan pemusnahan semua residu mikroba yang masuk ke dalam badan. Ini adalah imunoglobulin G yang bertanggungjawab untuk proses berjangkit dan keradangan kronik, yang mereka menyokong lambat, memusnahkan mikrob patogen sehingga mereka tidak dapat menyebabkan kematian, tetapi tidak cukup untuk mengeluarkannya sepenuhnya dari badan. Immunoglobulin E memberikan tindak balas alahan yang berterusan, kerana ia dihasilkan sebagai tindak balas terhadap pelbagai antigen yang terdapat di persekitaran. Dan imunoglobulin D mempunyai fungsi yang berbeza..

Oleh itu, dengan merumuskan perkara di atas, kita dapat menyimpulkan secara ringkas bahawa antibodi dalam darah boleh terdiri daripada kelas yang berlainan, dan bahawa setiap antibodi khusus khusus untuk mikrob atau biomolekul patogenik.

Apabila kehadiran antibodi dalam darah ditentukan dengan kaedah makmal, mereka mesti menunjukkan biomolekul mana atau mikroba antibodi mana yang dicari. Penentuan antibodi terhadap mikroba mana pun membolehkan anda memahami sama ada seseorang dijangkiti mikroorganisma ini atau tidak, kerana jika tidak ada jangkitan, maka tidak akan ada antibodi dalam darah. Tetapi jika ada jangkitan, maka antibodi yang dihasilkan oleh sistem kekebalan tubuh untuk memusnahkan mikroorganisma akan beredar di dalam darah seseorang.

Di samping itu, definisi antibodi dalam darah digunakan untuk memahami sama ada seseorang mempunyai jangkitan pada masa lalu. Aplikasi analisis untuk antibodi seperti itu mungkin disebabkan oleh kenyataan bahawa walaupun setelah pulih sepenuhnya dalam darah, sejumlah kecil antibodi (sel memori) tetap ada di dalam tubuh manusia, menghancurkan mikroba patogen. Antibodi ini beredar dalam darah "berjaga-jaga", sehingga apabila anda memasukkan mikroba yang sama, sudah biasa, segera memusnahkannya dan bahkan mencegah penyakit itu bermula. Sebenarnya, sel-sel memori inilah yang memberikan kekebalan terhadap jangkitan, iaitu orang yang telah menderita penyakit itu tidak lagi dijangkiti dengannya.

Jenis ujian darah untuk antibodi

Ujian darah untuk antibodi dilakukan untuk mengesan antibodi terhadap mikroorganisma atau biomolekul tertentu. Lebih-lebih lagi, untuk mengesan setiap jenis antibodi tertentu, analisis terpisah dilakukan. Sebagai contoh, sistem ketahanan badan terhadap virus hepatitis B menghasilkan beberapa antibodi yang berbeza - antibodi terhadap membran, antibodi terhadap DNA virus, dll. Oleh itu, satu analisis dilakukan untuk mengesan antibodi terhadap sampul virus hepatitis B, dan analisis lain dilakukan untuk mengesan antibodi terhadap DNA virus, dll. Oleh itu, peraturan mudah benar: satu jenis antibodi - satu analisis. Peraturan ini harus selalu dipertimbangkan ketika merancang pemeriksaan ketika perlu untuk mengesan antibodi dalam darah terhadap mikroorganisma patogenik atau biomolekul..

Kehadiran antibodi dalam darah terhadap pelbagai mikroba dan biomolekul ditentukan oleh sejumlah kaedah makmal yang berbeza. Pada masa ini, kaedah berikut adalah kaedah yang paling biasa untuk mengesan pelbagai antibodi dalam darah:

  • Ujian imunosorben berkait enzim (ELISA, ELISA);
  • Analisis radioimun (RIA);
  • Imunoblotting;
  • Teknik serologi (reaksi hemaglutinasi, reaksi hemaglutinasi tidak langsung, reaksi penghambatan hemaglutinasi, dll.).

Pertimbangkan kaedah untuk menentukan kehadiran antibodi dalam darah lebih banyak.

Ujian darah untuk antibodi ELISA

Pemeriksaan imunosorben berkait enzim (ELISA) membolehkan anda menentukan kehadiran pelbagai antibodi dalam darah. Pada masa ini, sebilangan besar ujian darah untuk antibodi dilakukan menggunakan kaedah ELISA, yang relatif mudah digunakan, murah dan sangat tepat..

Kaedah pengujian imunosorben berkait enzim terdiri daripada dua bahagian - kekebalan dan enzimatik, yang membolehkan anda "menangkap" mikroba atau biomolekul yang ditentukan dengan tepat dalam darah, dan kemudian menentukannya.

Bahagian kekebalan teknik ini adalah seperti berikut: dalam satu set untuk analisis makmal, antigen dilekatkan pada bahagian bawah sumur, yang dapat mengikat antibodi yang ditentukan dengan ketat. Apabila darah ujian dimasukkan ke dalam sumur ini, antibodi yang ada di dalamnya mengikat antigen di bahagian bawah lubang, membentuk kompleks yang kuat. Sekiranya tidak ada antibodi yang dapat dikesan dalam darah, maka kompleks yang kuat tidak terbentuk di dalam sumur, dan hasil analisisnya akan menjadi negatif. Setelah memasukkan darah uji ke dalam sumur, dibiarkan selama beberapa waktu, cukup untuk pembentukan kompleks antigen-antibodi, dan kemudian dituangkan. Seterusnya, sumur dibasuh beberapa kali dari sisa darah dengan larutan khas yang tidak dapat memisahkan kompleks antigen-antibodi yang dihasilkan yang terpasang kuat di bahagian bawah lubang.

Selanjutnya, bahagian enzim analisis dilakukan: enzim khas, biasanya peroksidase lobak, yang mengikat dengan kuat ke kompleks antigen-antibodi, dimasukkan ke dalam sumur yang dibasuh. Kemudian, hidrogen peroksida ditambahkan ke dalam sumur, yang peroksidase lobak terurai untuk membentuk bahan berwarna. Oleh itu, semakin banyak kompleks antigen-antibodi, semakin banyak jumlah peroksidase di dalam sumur. Ini bermaksud bahawa semakin banyak jumlah zat berwarna yang dihasilkan daripada penguraian hidrogen peroksida, dan semakin kuat warna larutan di dalam sumur. Kemudian, tahap keamatan warna zat yang diperoleh di telaga diukur pada alat khas, dan kepekatan peroksidase dikira terlebih dahulu. Setelah itu, berdasarkan kepekatan peroksidase, kepekatan kompleks antigen-antibodi dikira, dan, dengan demikian, jumlah antibodi yang terdeteksi dalam darah.

Seperti yang anda lihat, kaedah ELISA tidak rumit, tetapi boleh dipercayai, ringkas, bermaklumat dan sangat tepat. Lebih-lebih lagi, dengan menggunakan kaedah ELISA, anda dapat menentukan kepekatan hampir semua antibodi dalam darah - hanya "melekat" pada telaga bahan yang akan diikat oleh antibodi yang dikesan ini. Oleh kerana kualiti inilah kaedah ELISA banyak digunakan pada masa ini untuk mengesan pelbagai antibodi dalam darah manusia.

Analisis Radioimun (RIA)

Kaedah ini jarang digunakan untuk mengesan pelbagai antibodi kerana harganya yang tinggi, kekurangan peralatan yang diperlukan di makmal dan kerumitan pengeluaran reagen untuk pelaksanaannya. Pada dasarnya, RIA didasarkan pada prinsip yang sama dengan ELISA, hanya bahan yang digunakan untuk menentukan kepekatan antibodi yang diinginkan yang dilabelkan isotop yang memberikan sinaran, bukan peroksidase lobak. Secara semula jadi, pengeluaran isotop berlabel dan penetapannya pada antigen yang melekat pada dasar sumur jauh lebih rumit dan lebih mahal daripada pengeluaran peroksidase lobak. Selebihnya, RIA terdiri dari dua tahap yang sama dengan ELISA - pada tahap pertama, kekebalan tubuh, antibodi yang diinginkan dari darah mengikat antigen yang melekat pada bahagian bawah lubang. Dan pada tahap kedua, isotop berlabel radio mengikat kompleks antigen-antibodi, dan jumlahnya sebanding dengan kepekatan antibodi yang diinginkan. Selanjutnya, alat khas menangkap jumlah impuls yang dihantar oleh isotop, yang kemudian ditukar menjadi kepekatan antibodi yang dikesan.

Ketidakseragaman

Kaedah ini adalah gabungan ELISA atau RIA dengan elektroforesis. Immunoblotting adalah kaedah yang sangat tepat untuk mengesan antibodi terhadap pelbagai mikroorganisma atau biomolekul, dan itulah sebabnya ia digunakan secara aktif.

Imunoblotting terdiri daripada fakta bahawa pertama antigen dari pelbagai mikroba dipisahkan dengan elektroforesis gel, selepas itu pecahan antigen yang berlainan ini digunakan pada kertas khas atau membran nitroselulosa. Dan kemudian, pada jalur kertas atau membran ini, di mana antigen yang diketahui terpasang, ELISA atau RIA konvensional dijalankan untuk mengesan kehadiran antibodi terhadap mikroba dalam darah yang antigennya terpaku pada kertas atau membran.

Teknik serologi (titer antibodi kiraan darah)

Kaedah serologi untuk mengesan antibodi dalam darah seseorang terhadap pelbagai mikroorganisma yang menyebabkan penyakit berjangkit adalah kaedah tertua "ujian antibodi". Tetapi kerana "usia tua" kaedah ini tidak kehilangan kaitannya, ketepatan yang agak tinggi dan masih banyak digunakan untuk pengesanan awal antibodi terhadap beberapa virus, bakteria dan protozoa yang berbahaya. Dan sejumlah penyakit dengan adanya antibodi terhadap mikrob patogen dalam darah dapat didiagnosis walaupun dengan kaedah serologi.

Kaedah serologi merangkumi reaksi peneutralan (RN), reaksi penghambatan hemaglutinasi (RTHA), reaksi hemaglutinasi tidak langsung (RNGA, RPHA), ujian penghambatan adsorpsi hemadorpsi (RTGA), reaksi pengikat pelengkap (RSC), dan reaksi imunofluoresensi (RIF). Semua kaedah serologi didasarkan pada interaksi antibodi yang diinginkan (ditentukan) yang terdapat dalam darah manusia dengan antigen. Pada masa yang sama, bahan semacam itu dipilih sebagai antigen yang harus bertindak balas oleh antibodi yang cuba dikesan. Dalam praktiknya, ada set antigen siap sedia dari pelbagai mikroba yang menyambung ke darah ujian, dan jika yang terakhir mengandungi antibodi terhadap antigen yang diambil, maka hasil analisisnya positif - yaitu, darah manusia mengandung antibodi terhadap mikroba yang dipilih untuk dianalisis.

Semasa reaksi serologi, juga mungkin untuk menentukan kepekatan antibodi yang dapat dikesan dalam darah. Hanya kepekatan ini dinyatakan tidak dalam miligram per mililiter atau dalam nilai biasa yang lain, tetapi dalam kredit. Marilah kita mempertimbangkan dengan lebih terperinci apa maksudnya dan bagaimana reaksi serologi dijalankan..

Sudah tentu, setiap jenis reaksi serologi mempunyai peraturan tersendiri untuk melakukan, tetapi kita akan cuba menerangkan secara umum bagaimana ia dibuat, kerana pada dasarnya ia adalah jenis yang sama. Jadi, sebarang reaksi serologi didasarkan pada fakta bahawa serum darah ujian dengan antibodi yang disarankan di dalamnya dimasukkan ke dalam lubang atau tabung uji. Kemudian, sejumlah antigen mikroba ditambahkan ke serum yang sama, yang kononnya ada antibodi dalam darah.

Seterusnya, serum darah ujian dicairkan 10 kali, dituangkan ke dalam tabung uji atau telaga lain dan antigen ditambahkan ke dalamnya. Kemudian serum darah dicairkan sekali lagi 10 kali, sudah menjadi pencairan 1: 100, diletakkan di dalam telaga berasingan atau tabung uji dan antigen ditambahkan. Beberapa pencairan melakukan ini, misalnya, 1: 1, 1: 100, 1: 1000, 1: 10000, dll. Pencairan 10 tidak selalu diperlukan, mereka sering menggunakan pencairan dua kali, dan dalam kes ini tabung uji dengan pengenceran serum 1: 1, 1: 2, 1: 4, 1: 8, dan lain-lain diperoleh. Pencairan seperti itu disebut kapsyen..

Antigen mikroba ditambahkan ke dalam tiub dengan semua pengenceran, antibodi yang mereka cuba kenal pasti. Kemudian tiub atau telaga diinkubasi (mereka dibiarkan di tempat yang hangat atau pada suhu bilik untuk sementara waktu, dan setiap masa inkubasi mempunyai waktu inkubasinya sendiri) sehingga antigen dapat menghubungi antibodi, jika ada, tentu saja, terdapat dalam darah. Setelah selesai pengeraman, sel darah merah murni ayam, jantan, dll dimasukkan ke dalam tabung uji dengan semua pengenceran. Seterusnya, mereka melihat tabung uji mana yang merosakkan sel darah merah ini. Bagaimanapun, jika kompleks antigen-antibodi telah terbentuk, ia mempunyai sifat-sifat tertentu, di antaranya pemusnahan sel-sel darah merah tulen yang disediakan khas. Sekiranya pemusnahan sel darah merah dapat dilihat dalam tabung uji, maka perhatikan pencairan serum di dalamnya. Dan ini bermaksud bahawa antibodi yang dikehendaki terdapat dalam darah manusia dalam titer, misalnya, 1: 8.

Berapa banyak ujian darah yang dilakukan untuk antibodi?

Ujian darah untuk antibodi dengan kaedah apa pun (ELISA, RIA, imunoblot, kaedah serologi), pada prinsipnya, dilakukan dalam beberapa jam, maksimum sehari. Tetapi dalam praktiknya, makmal tidak memberikan hasil beberapa jam setelah pendermaan darah, yang disebabkan oleh ciri-ciri kerja institusi perubatan.

Oleh itu, pertama, mana-mana makmal, bahkan yang swasta, menunggu beberapa jam X, apabila ia mempunyai satu set sampel yang lengkap untuk hari ini. Contohnya, jam seperti X ialah 12-00. Ini bermaksud bahawa walaupun seseorang menderma darah pada pukul 8-00 pagi, hingga jam 12-00, dia hanya akan disimpan di dalam peti sejuk sehingga tempoh pengambilan sampel berakhir. Selanjutnya, pada jam 12-00, seorang pekerja makmal akan membuat sampel darah ke tempat kerja, yang akan memakan waktu beberapa jam. Oleh itu, hasilnya hanya pada waktu petang, dan mungkin pada waktu pagi, jika teknik analisisnya panjang.

Kedua, kerana jumlah permintaan yang sedikit, banyak makmal tidak melakukan sejumlah analisis setiap hari, tetapi hanya seminggu sekali atau sebulan sekali. Dalam kes ini, ada hari X yang ditentukan, di mana semua sampel yang dikumpulkan selama seminggu atau bulan dimasukkan ke dalam operasi. Sehingga hari itu, sampel darah akan disimpan dalam keadaan beku. Sekiranya makmal beroperasi berdasarkan prinsip ini, maka hasil analisis untuk antibodi dapat dikeluarkan dalam 1 hingga 4 minggu, bergantung pada frekuensi pelaksanaan metodologi ini di institusi tertentu.

Ujian antibodi total

Dalam darah, kepekatan pelbagai jenis antibodi dapat ditentukan, iaitu IgG, IgM, IgA, IgE. Lebih-lebih lagi, kepekatan setiap jenis antibodi sering ditentukan secara berasingan, kerana mempunyai nilai diagnostik yang berbeza. Tetapi dalam beberapa kes, ketika maklumat dari sudut pandang diagnosis, kepekatan semua jenis antibodi ditentukan sekaligus, iaitu IgG + IgM + IgA. Situasi apabila kepekatan beberapa jenis antibodi dalam darah ditentukan disebut analisis antibodi total.

Ujian sedemikian untuk jumlah antibodi dapat dilakukan untuk mendiagnosis pelbagai jangkitan, misalnya, hepatitis C, sifilis, dll..

Ujian darah antibodi IgG (ujian antibodi g)

Singkatan igg adalah catatan IgG yang tidak betul, yang bermaksud imunoglobulin seperti Gee. Imunoglobulin ini adalah antibodi yang dihasilkan oleh sistem imun untuk memusnahkan pelbagai mikrob patogen yang masuk ke dalam badan. Oleh itu, jelas bahawa antibodi igg adalah antibodi jenis IgG yang dapat terdapat dalam darah dan ditentukan oleh kaedah analisis makmal..

Walau bagaimanapun, ujian antibodi IgG sederhana tidak wujud, kerana sistem imun menghasilkan antibodi jenis ini terhadap mikroba yang berbeza. Lebih-lebih lagi, untuk setiap mikroba, pelbagai IgGnya dihasilkan, dan semuanya berbeza. Maksudnya, antibodi IgG terhadap virus campak - sendiri, terhadap virus rubella - kedua, melawan virus influenza - ketiga, terhadap staphylococcus - keempat, dll. Oleh itu, ujian IgG darah dapat dilakukan terhadap virus campak, terhadap virus rubella, terhadap mycobacterium tuberculosis, dll. Oleh itu, pertama anda perlu mengetahui antibodi terhadap mikroba tertentu yang perlu anda cari dalam darah, dan hanya kemudian melakukan analisis untuk antibodi seperti IgG terhadap mikroorganisma ini.

Ujian darah untuk antibodi terhadap virus

Virus adalah mikroorganisma patogen, apabila meresap ke dalam badan, sistem imun mula menghasilkan antibodi untuk memusnahkannya. Tetapi terhadap setiap virus, sistem imun menghasilkan antibodi uniknya sendiri yang hanya sesuai untuk jenis mikrob ini. Oleh itu, adalah mungkin untuk mendeteksi adanya antibodi terhadap virus tertentu, tetapi tidak mungkin untuk menentukan antibodi terhadap virus secara umum. Oleh itu, sebelum mengambil ujian darah untuk virus, anda mesti mengetahui antibodi mikroorganisma virus yang ingin dijumpai oleh seseorang.

Hasil darah untuk antibodi

Menyahkod ujian darah untuk antibodi

Hasil ujian darah untuk antibodi yang dilakukan dengan kaedah apa pun selalu ada dua jenis - positif atau negatif. Hasil positif bermaksud bahawa antibodi yang diinginkan terhadap mikroba atau biomolekul telah dijumpai dalam darah manusia. Ini menunjukkan bahawa orang tersebut pada masa lalu atau ketika ini dijangkiti mikroba (penyakit berjangkit). Hasil negatif bermaksud bahawa antibodi yang diinginkan tidak dijumpai dalam darah seseorang, dan dia tidak dijangkiti penyakit berjangkit, cacing, dll..

Selain itu, dengan hasil analisis positif untuk antibodi, kepekatannya hampir selalu ditunjukkan. Sekiranya penentuan dilakukan oleh ELISA, RIA atau imunoblotting, kepekatan antibodi ditunjukkan dalam IU / ml. Tetapi jika kaedah serologi digunakan untuk analisis darah untuk antibodi, maka dalam hal ini kepekatan antibodi ditunjukkan dalam kredit, misalnya, 1:64, dll..

Penyahkodan setiap analisis untuk antibodi bergantung pada jenis antibodi apa yang dikesan dalam darah (IgG, IgM, IgA), serta mikroba atau biomolekul mana antibodi ini. Contohnya, jika antibodi jenis IgG dan IgM terhadap mikroorganisma patogen dikesan dalam darah, ini menunjukkan bahawa seseorang sedang menderita penyakit berjangkit yang disebabkan oleh mikroba ini. Pengesanan antibodi terhadap mikroba jenis IgG dalam darah menunjukkan adanya jangkitan kronik atau seseorang itu mengalaminya pada masa lalu dan pulih.

Selalunya, untuk menentukan berapa lama seseorang dijangkiti mikroba, bukan sahaja kepekatan antibodi seperti IgG dalam darah dinilai, tetapi juga ketahanannya. Ketersediaan antibodi menentukan berapa lama ia beredar dalam darah manusia. Oleh itu, semakin tinggi ketersediaan, semakin besar had penyakit berjangkit. Contohnya, jika ketahanan antibodi terhadap rubella kurang dari 40%, seseorang baru-baru ini menghidap penyakit ini, dalam tiga bulan ke depan. Dan jika ketahanan antibodi terhadap rubella lebih dari 60%, maka jangkitan dipindahkan lebih dari enam bulan yang lalu.

Norma ujian darah untuk antibodi

Kadar analisis untuk antibodi bergantung pada jenis antibodi yang "dicari" untuk orang tertentu. Sebagai contoh, jika seorang wanita yang merancang kehamilan diuji untuk antibodi terhadap virus rubella, maka kehadiran antibodi tersebut dalam darah, iaitu hasil ujian positif, dianggap baik. Memang, jika seorang wanita mempunyai antibodi, itu berarti dia telah "menemui" virus rubella (dia sakit atau diberi vaksin), tubuh telah mengalami kekebalan tubuh, dan sekarang ia telah bertahan. Jadi, wanita seperti itu tidak diancam dengan jangkitan rubella semasa kehamilan yang akan datang, dan dia tidak mempunyai risiko bahawa anak itu akan dilahirkan pekak kerana rubella pada ibunya.

Sekiranya antibodi terhadap DNA dijumpai dalam darah manusia, maka ini adalah hasil analisis yang buruk, kerana ini menunjukkan penyakit autoimun yang serius, ketika sistem kekebalan tubuh secara keliru menganggap organ dan jaringannya asing, dan secara sistematik memusnahkannya.

Di mana untuk mengambil (melakukan) ujian darah untuk antibodi?

Mendaftar untuk belajar

Untuk membuat janji temu dengan doktor atau diagnostik, anda hanya perlu menghubungi satu nombor telefon
+7 495 488-20-52 di Moscow

+7 812 416-38-96 di St. Petersburg

Pengendali akan mendengarkan anda dan mengalihkan panggilan ke klinik yang dikehendaki, atau menerima pesanan untuk rakaman kepada pakar yang anda perlukan..


Ujian darah untuk pelbagai antibodi boleh diambil di makmal swasta atau awam yang melakukan ujian yang diperlukan. Oleh kerana analisis untuk setiap jenis antibodi dilakukan dengan menggunakan kit khas, anda mesti terlebih dahulu menentukan dengan tepat antibodi mana yang anda perlukan untuk mengesan, dan hanya kemudian mengetahui makmal mana yang dapat melakukan ini.

Berapa banyak ujian darah untuk antibodi?

Bergantung pada antibodi mana yang akan ditentukan dalam darah, kos analisisnya mungkin berbeza. Ujian yang paling mudah dan murah berharga kira-kira 100 rubel (contohnya, untuk antibodi selama kehamilan), dan yang mahal - sehingga 3000 rubel. Kos analisis khusus untuk antibodi terhadap mikroorganisma atau biomolekul tertentu mesti dijumpai secara langsung di makmal yang melakukan kajian tersebut.

Kekebalan humor. Antibodi dalam plasma darah - video

Tusukan, analisis untuk antibodi dan penanda tumor, serologi, skala EDSS untuk sklerosis berganda - video

Gejala poliomielitis. Makmal dan diagnosis pembezaan poliomielitis. Antibodi terhadap virus - video

Pengarang: Nasedkina A.K. Pakar Penyelidikan Bioperubatan.

Bagaimana dan di mana untuk mendapatkan ujian darah untuk antibodi? Kadar antibodi untuk lelaki, wanita dan kanak-kanak

Tubuh manusia bukan sahaja dapat melawan pelbagai penyakit dengan sendirinya, tetapi juga dapat mengingat "agen berbahaya" yang harus dihadapinya. Hasil "pengalaman" ini adalah adanya protein spesifik dalam darah - antibodi. Apa itu dan mengapa antibodi tidak hanya "berguna", tetapi juga "berbahaya"?

Antibodi adalah globulin spesifik (imunoglobulin) yang mempunyai pusat aktif untuk menangkap dan meneutralkan antigen..

Pelbagai antibodi dalam darah memungkinkan kita menilai apa yang seseorang sakit ketika dia sakit pada masa ini, seberapa baik sistem kekebalannya berfungsi. Sekiranya imunoglobulin meningkat, ini bermaksud bahawa tubuh bertindak balas terhadap serangan agen yang datang secara semula jadi atau diperkenalkan khas.

Antibodi terbentuk:

  • Hasil daripada imunisasi semula jadi - sebagai tindak balas terhadap jangkitan masa lalu, serangan protein asing secara genetik
  • Hasil daripada imunisasi buatan - sebagai tindak balas terhadap vaksinasi, agen patogen yang lemah diperkenalkan secara khusus ke dalam badan

Mengenai kemampuan tubuh manusia untuk mengingat patogen dan dengan cepat membentuk tindak balas imun terhadap serangan berulang, sistem imunisasi kanak-kanak telah dibina.

Imunoglobulin dapat mengingat dan membezakan antigen "mereka". Mereka meneutralkan hanya yang mereka terbentuk. Keupayaan antibodi ini disebut saling melengkapi..

Apa itu antibodi?

Semua antibodi dibahagikan kepada dua kumpulan mengikut ukuran molekul:

  • 7S kecil (a-globulin)
  • 19S besar (a-globulin)

Organisasi Kesihatan Antarabangsa telah memperkenalkan klasifikasi gabungan kepelbagaian antibodi mengikut "orientasi" mereka.

Kelas AntibodiBerada di badanCiriApa yang menyebabkan
Ig GBeredar dalam darah, hingga 80% dari semua antibodiMampu menyeberangi plasenta, menahan panas hingga 75 darjah, adalah reaksi alergi dari jenis yang tertundaMuncul sebagai tindak balas sekunder dan utama kepada ejen
Sepanjang hayat - 23 hari
Ig ASerum dan rembesanSerum terbentuk di limpa, kelenjar getah bening, membran mukus dan memasuki air liur, susu atau kolostrum, rembesan bronkus, cecair lakrimal, pembuangan hidungIa berlaku apabila kulit dan selaput lendir bersentuhan dengan pengaruh persekitaran. Fungsi utamanya adalah untuk mencegah penembusan antigen ke dalam tisu (ARI, kerosakan hati, alkohol)
Sekretori (tempatan) - terbentuk di membran mukus sistem pencernaan, pernafasan sebagai tindak balas terhadap jangkitanSepanjang hayat - 6 hari
Ig MBeredar dalam darah, membentuk dari 5% hingga 10% dari semua antibodiJangan melintasi plasentaYang pertama berlaku semasa jangkitan
Sepanjang hayat - 5 hari
Ig DDalam serum darah hingga 1%Tidak mengikat tisuIa diperbaiki dalam patologi kronik dan myeloma
Ig EPada kulit lendir dan submukosa, adenoid, bronkus, perut, ususIa dikembangkan secara tempatan sebagai tindak balas langsung terhadap kesan berjangkit yang agresif.Tindak balas segera terhadap alergen dan parasit
Tidak melintasi plasentaSepanjang hayat - 2 hari

Bagi tubuh, kesan antibodi pada antigen mungkin bermanfaat, berbahaya atau neutral..

  • Yang positif ialah agen berbahaya dinetralkan dan dimusnahkan,
  • Reaksi berbahaya terdiri daripada pengembangan tindak balas imun yang diarahkan terhadap tubuh itu sendiri (reaksi autoimun), penolakan tisu semasa pemindahan, konflik Rh semasa kehamilan, perkembangan kejutan anafilaksis.

Ujian antibodi

Ujian untuk antibodi menunjukkan tempoh dan peringkat penyakit, untuk menentukan agen penyebab penyakit ini. Untuk diagnosis yang betul, penting bukan sahaja kehadiran sejumlah imunoglobulin tertentu di dalam badan, tetapi juga keadaan dinamiknya. Dalam ujian darah makmal untuk jangkitan, keadaan antibodi adalah penanda untuk kehadiran atau ketiadaan yang diinginkan.

Anda boleh mengambil analisis di klinik di tempat kediaman. Pensampelan darah dilakukan dari urat. Persiapan awal untuk analisis sedemikian adalah bahawa darah harus didermakan ke perut kosong. Lebih baik pada waktu pagi, sebelum sarapan. Sekiranya ini tidak dapat dilakukan, sekurang-kurangnya 4 jam harus berlalu dari makan terakhir hingga waktu pengambilan sampel darah.

Imunoglobulin dari kelas berikut mempunyai kepentingan diagnostik:

Kadar antibodi dalam tubuh lelaki, wanita dan kanak-kanak

IgAIgGIgM
Lelaki1.03 - 4.04 g / l6.64 - 14.0 g / l0,55 - 1,41 g / l
Wanita0,54 - 3,43 g / l5.87 - 16.3 g / l0.37 - 1.95 g / l
Anak0.15 - 2.5 g / l7.3 - 13.5 g / ldari 0.8 - 1.5 g / l

Perkembangan proses patologi dibuktikan bukan hanya dengan peningkatan, tetapi juga penurunan tahap antibodi dalam tubuh. Penyahkodan tepat keputusan ujian dilakukan oleh pakar.

Kemungkinan patologi dengan penyimpangan petunjuk dari norma

  • IgG - kekurangan mungkin menunjukkan perkembangan reaksi alergi, dengan distrofi otot atau neoplasma. Tahap peningkatan adalah ciri penyakit autoimun, sarcoidosis, tuberkulosis, HIV
  • IgM - kekurangan luka bakar, limfoma, patologi perut, usus. Kandungan yang meningkat bermaksud gangguan pernafasan, pencernaan
  • IgA - kekurangan anemia, penyakit radiasi, patologi dermatologi. Peningkatan petunjuk menunjukkan perkembangan jangkitan purulen, fibrosis kistik, hepatitis, arthritis, dll..

Pengeluaran antibodi bermula sejak lahir dan berterusan hingga usia tua. Jumlah darah mereka berbeza-beza bergantung pada usia, jantina dan keadaan orang tersebut. Makmal penentuan antibodi adalah kaedah maklumat yang tepat..

Antibodi pada kanak-kanak

Bayi yang baru lahir disterilkan hanya sehingga ia dilahirkan. Setelah muncul di dunia, ia segera diserang oleh pelbagai mikroorganisma. Anak diletakkan di dada ibu untuk "dihuni" oleh bakteria ibu. Anak mendapat imuniti pertama terhadap bakteria ini melalui plasenta dalam bentuk antibodi "siap pakai".

Tempoh krisis pembentukan imuniti:

  • bulan pertama kehidupan
  • 4-6 bulan hidup
  • 2-3 tahun
  • Berumur 6-7 tahun
  • 12-16 tahun

Kepentingan penyusuan bukan sahaja susu ibu mudah dicerna dan membekalkan semua nutrien yang diperlukan, tetapi juga susu dimasukkan ke dalam badan bayi yang baru lahir dari dunia luar - antibodi ibu. Masa kritikal pertama bayi yang baru lahir di bawah perlindungan imuniti tersebut berlangsung 29 hari.

Krisis kedua dalam perkembangan status imun anak jatuh pada 4-6 bulan dalam hidupnya. Dalam tempoh ini, kesan imuniti ibu yang diperoleh berakhir, tetapi kesannya belum terbentuk. Tubuh bayi mampu menghasilkan imunoglobulin kelas M "bertindak pantas", tetapi tidak mempunyai perlindungan jangka panjang terhadap antibodi G. Di sini, perkembangan jangkitan usus, catarrhal.

Tempoh "sukar" seterusnya dalam pembentukan sistem imun anak berlaku dalam 2 tahun hidupnya. Tubuh belum dapat menghasilkan antigen A dalam jumlah yang mencukupi, yang bertanggungjawab terhadap imuniti tempatan, dan anak itu aktif mempelajari dunia, kenalannya meningkat. Aduan mengenai "peningkatan kejadian" dari mengunjungi tadika tidak dikaitkan dengan "kecuaian pendidik", tetapi dengan keanehan perkembangan tubuh anak-anak.

Sebelum kematangan penuh kanak-kanak, dua lagi krisis menanti: pada usia 6-7 tahun dan remaja. Krisis dalam pembentukan tindak balas imun terhadap pengaruh luaran pada awal tempoh persekolahan dikaitkan dengan ketidakmatangan sistem limfatik dan adanya (opsional) pencerobohan helminthik (disahkan oleh kandungan antibodi IgE), yang merosakkan pertahanan anak. Krisis remaja dikaitkan dengan kelewatan sistem imun dari pertumbuhan badan yang umum dan cepat. Kelebihannya adalah penyusunan semula sistem hormon dan peningkatan kegembiraan saraf.

Antibodi semasa mengandung

Antibodi semasa kehamilan tidak berfungsi sebagai "pembantu, tetapi sebagai penentang" ketika sistem kekebalan tubuh ibu diarahkan pada janin. Ini mungkin berlaku dengan konflik Rhesus.

Konflik Rhesus berkembang jika seorang wanita mempunyai darah Rhesus negatif, bakal bapa anak itu positif dan anak tersebut mewarisi darah ayah. Organisme ibu menganggap anak "positif" sebagai faktor asing dan berusaha menyingkirkannya. Antibodi Rh khas dihasilkan, yang membawa kepada pengguguran spontan pada peringkat awal.

Antibodi semasa mengandung

Sekiranya ibu Rh-negatif mempunyai kehamilan Rh-positif terlebih dahulu, maka dia pergi dengan tenang. Tetapi antibodi terbentuk di dalam badan ibu yang akan menyerang kehamilan yang serupa. Untuk memusnahkan imunoglobulin seperti itu, seorang wanita hamil disuntik dengan anti-D-immunoglobulin. Langkah tepat waktu yang diambil dapat mengurangkan risiko tindak balas imun negatif terhadap kehamilan berikutnya.

Antibodi Rh adalah normal bagi wanita yang sihat apabila tidak dikesan..

Antibodi pada Warga Emas

Perubahan berkaitan dengan usia pada sistem imun tidak banyak memberi kesan. Proses negatif pada tahap humoral dan selular memberi kesan yang lebih besar kepadanya. Perubahan degeneratif membawa kepada perkembangan reaksi autoimun - pengeluaran antibodi ke tisu mereka sendiri. Oleh itu perkembangan artritis, tiroiditis, komponen asma.

Salah satu sebab perkembangan penyakit autoimun, displasia jinak atau tumor malignan adalah sel bermutasi yang tidak dikenali dan dimusnahkan oleh sistem imun tepat pada masanya..

Sebab-sebab ujian

Ujian antibodi dijalankan untuk menentukan dan mengesan dinamika patologi berikut:

  • Antibodi terhadap tiroid peroksidase (TPO) - analisis dilakukan untuk menentukan patologi tiroid, termasuk sifat autoimun,
  • Hepatitis C, B, D, A, E,
  • HIV - dilakukan hingga 3 kali, diagnosis dibuat setelah 3 ujian positif,
  • Leptospirosis,
  • Difteria,
  • Rubella,
  • Chlamydia,
  • Herpes,
  • Sifilis,
  • Tetanus,
  • Cytomegalovirus,
  • Ureaplasmosis.

Semasa menjalankan analisis untuk antibodi, bukan sahaja jenis agen penting, tetapi juga masa kajian. Sekiranya tidak ada imunoglobulin yang dikesan dalam 5 hari pertama penyakit ini, ini tidak menunjukkan ketiadaan jangkitan.

Tindak balas imun utama memerlukan masa lebih lama daripada yang sekunder. Jangkitan primer dicirikan oleh kehadiran antibodi kelas M, sementara G-globulin muncul kemudian.

ANTIBODI

Antibodi adalah protein pecahan globulin serum darah manusia dan haiwan berdarah panas yang terbentuk sebagai tindak balas terhadap pengenalan pelbagai antigen (bakteria, virus, toksin protein, dan lain-lain) dan secara khusus berinteraksi dengan antigen yang menyebabkan pembentukannya. Dengan mengikat ke laman aktif (pusat) dengan bakteria atau virus, antibodi menghalang pembiakannya atau meneutralkan bahan toksik yang dikeluarkan olehnya. Kehadiran antibodi dalam darah menunjukkan bahawa tubuh berinteraksi dengan antigen terhadap penyakit yang ditimbulkannya. Sejauh mana imuniti bergantung pada antibodi dan sejauh mana antibodi hanya menyertai imuniti diputuskan berkaitan dengan penyakit tertentu. Penentuan tahap antibodi dalam serum darah memungkinkan kita menilai intensiti imuniti walaupun dalam keadaan ketika antibodi tidak memainkan peranan pelindung yang menentukan.

Kesan perlindungan antibodi yang terkandung dalam serum imun banyak digunakan dalam rawatan dan pencegahan penyakit berjangkit (lihat Seroprophylaxis, Serotherapy). Reaksi antibodi dengan antigen (reaksi serologi) digunakan dalam diagnosis pelbagai penyakit (lihat kajian Serologi).

Kandungan

Cerita

Sudah sekian lama mengenai bahan kimia tersebut. alam A. tahu sangat sedikit. Telah diketahui bahawa antibodi selepas pemberian antigen terdapat dalam serum darah, limfa, ekstrak tisu dan bahawa mereka bertindak balas secara khusus dengan antigennya. Kehadiran antibodi dinilai berdasarkan agregat yang dapat dilihat yang terbentuk semasa interaksi dengan antigen (aglutinasi, pemendakan) atau oleh perubahan sifat antigen (peneutralan toksin, lisis sel), tetapi hampir tidak ada yang diketahui substrat kimia antibodi mana.

Berkat penerapan ultrasentrifugasi, imuno-elektroforesis dan mobiliti protein dalam bidang isoelektrik, antibodi terbukti tergolong dalam kelas globulin gamma, atau imunoglobulin.

Antibodi adalah globulin normal yang dibentuk semasa sintesis. Globulin imun yang diperoleh dengan mengimunisasi haiwan yang berbeza dengan antigen yang sama dan ketika mengimunisasi spesies haiwan yang sama dengan antigen yang berlainan mempunyai sifat yang berbeza, sama seperti globulin serum dari spesies haiwan yang berlainan tidak sama.

Kelas imunoglobulin

Imunoglobulin dihasilkan oleh sel-sel imunocompetent organ limfoid dan berbeza dalam berat molekul, pemalar pemendapan, mobiliti elektroforetik, kandungan karbohidrat dan aktiviti imunologi. Terdapat lima kelas (atau jenis) imunoglobulin:

Immunoglobulin M (IgM): berat molekul kira-kira 1 juta, mempunyai molekul kompleks; yang pertama muncul selepas imunisasi atau rangsangan antigenik, mempunyai kesan buruk pada mikroba yang memasuki aliran darah, menyumbang kepada fagositosis mereka; lebih lemah daripada imunoglobulin G, mengikat antigen larut, toksin bakteria; dimusnahkan dalam badan 6 kali lebih cepat daripada imunoglobulin G (contohnya, pada tikus, waktu paruh imunoglobulin M adalah 18 jam, dan masa imunoglobulin G adalah 6 hari).

Immunoglobulin G (IgG): berat molekul kira-kira 160,000, mereka dianggap sebagai antibodi standard, atau klasik: mereka dengan mudah melalui plasenta; terbentuk lebih perlahan daripada IgM; paling berkesan mengikat antigen larut, terutamanya eksotoksin, dan juga virus.

Immunoglobulin A (IgA): berat molekul kira-kira 160,000 atau lebih, dihasilkan oleh tisu limfoid membran mukus, menghalang penurunan enzim dalam sel-sel badan dan menentang kesan patogen kuman usus, dengan mudah menembusi penghalang sel badan, terkandung dalam kolostrum, air liur, air mata, dan mukus usus peluh, dipisahkan oleh hidung, dalam darah dalam jumlah yang lebih kecil, mudah dihubungkan ke sel-sel badan; IgA muncul, nampaknya, dalam proses evolusi untuk melindungi selaput lendir dari serangan bakteria dan menyebarkan imuniti pasif kepada keturunan.

Immunoglobulin E (IgE): berat molekul kira-kira 190,000 (menurut R. S. Nezlin, 1972); nampaknya mereka adalah antibodi alahan - reagen yang disebut (lihat di bawah).

Immunoglobulin D (IgD): berat molekul sekitar 180,000 (menurut R. S. Nezlin, 1972); sangat sedikit yang diketahui mengenai mereka pada masa ini.

Struktur antibodi

Molekul imunoglobulin terdiri daripada dua subunit polipeptida yang tidak serupa - rantai ringan (L - dari cahaya Inggeris) dengan berat molekul 20,000 dan dua rantai berat (H - dari bahasa Inggeris berat) dengan berat molekul 60,000. Rantai ini, dihubungkan oleh jambatan disulfida, membentuk monomer utama Lh. Walau bagaimanapun, dalam keadaan bebas, monomer seperti itu tidak berlaku. Sebilangan besar molekul imunoglobulin terdiri daripada dimer (LH)2, selebihnya adalah dari polimer (LH)2n. Asid amino terminal N utama globulin manusia adalah aspartik dan glutamat, dan arnab - asid alanin dan aspartik. Porter (RR Porter, 1959), yang bertindak pada imunoglobulin papain, mendapati bahawa mereka terurai menjadi dua (I dan II) fragmen Fab dan satu fragmen Fc (III) dengan pemalar pemendapan 3.5S dan berat molekul sekitar 50,000. karbohidrat terikat pada serpihan Fc. Atas cadangan pakar WHO, penamaan serpihan antibodi berikut telah dibentuk: Fragmen Fab - monovalen, aktif menyambung ke antigen; Fragmen Fc - tidak berinteraksi dengan antigen dan terdiri daripada bahagian C-terminal dari rantai berat; Fd fragment adalah tapak rantai berat yang merupakan sebahagian dari fragmen Fab. Sebahagian daripada hidrolisis pepsin 5S dicadangkan untuk dinyatakan sebagai F (ab)2, dan serpihan 3,5S monovalen ialah Fab.

Kekhususan antibodi

Salah satu sifat antibodi yang paling penting adalah kekhususannya, yang dinyatakan dalam kenyataan bahawa antibodi lebih aktif dan lebih lengkap berinteraksi dengan antigen yang dengannya badan itu dirangsang. Kompleks antigen-antibodi dalam kes ini mempunyai kekuatan terbesar. Antibodi dapat membezakan perubahan kecil dalam struktur antigen. Semasa menggunakan antigen konjugasi yang terdiri daripada protein dan bahan kimia sederhana yang disertakan - hapten, antibodi yang dihasilkan khusus untuk hapten, protein dan kompleks protein-hapten. Kekhususannya disebabkan oleh struktur kimia dan corak spasial antideterminant antibodi (pusat aktif, kumpulan reaktif), iaitu bahagian antibodi yang menghubungkannya dengan penentu antigen. Bilangan anti-penentu antibodi sering disebut valensi mereka. Jadi, molekul antibodi IgM boleh mempunyai hingga 10 valensi; Molekul antibodi IgG dan IgA divalen.

Menurut Karash (F. Karush, 1962), pusat IgG aktif terdiri daripada 10-20 residu asid amino, yang kira-kira 1% daripada semua asid amino molekul antibodi, dan, menurut Winkler (M. N. Winkler, 1963), pusat aktif terdiri daripada dari 3-4 residu asid amino. Tyrosine, lisin, triptofan, dan lain-lain terdapat dalam komposisi mereka. Antidetereteran jelas terletak di bahagian-bahagian amino-fragmen Fab. Segmen rantai ringan dan berat yang berubah-ubah terlibat dalam pembentukan pusat aktif, dengan bahagian kedua memainkan peranan utama. Mungkin rantai ringan hanya sebahagian terlibat dalam pembentukan pusat aktif atau menstabilkan struktur rantai berat. Antideterminant yang paling lengkap dibuat hanya dengan gabungan rantai ringan dan berat. Semakin banyak titik padanan antara antideterminan antibodi dan penentu antigen, semakin tinggi kekhususannya. Kekhususan yang berbeza bergantung pada urutan residu asid amino di pusat aktif antibodi. Pengekodan pelbagai jenis antibodi mengikut kekhususannya tidak jelas. Porter membolehkan tiga kemungkinan kekhususan.

1. Pembentukan bahagian stabil molekul imunoglobulin dikendalikan oleh satu gen, dan bahagian berubah oleh ribuan gen. Rantai peptida yang disintesis digabungkan menjadi molekul imunoglobulin di bawah pengaruh faktor selular khas. Antigen dalam kes ini bertindak sebagai faktor yang mencetuskan sintesis antibodi.

2. Molekul imunoglobulin dikodekan oleh gen yang stabil dan berubah-ubah. Dalam tempoh pembelahan sel, penggabungan gen pemboleh ubah berlaku, yang menentukan kepelbagaian mereka dan kebolehubahan bahagian molekul globulin.

3. Gen yang menyandikan bahagian pemboleh ubah molekul imunoglobulin rosak oleh enzim tertentu. Enzim lain membaiki kerosakan, tetapi kerana kesilapan membolehkan urutan nukleotida yang berlainan dalam gen tertentu. Ini disebabkan oleh urutan asid amino yang berbeza dalam bahagian molekul imunoglobulin yang berubah-ubah. Terdapat hipotesis lain, sebagai contoh. Burnet (F. M. Burnet, 1971).

Heterogenitas (heterogenitas) antibodi ditunjukkan dengan pelbagai cara. Sebagai tindak balas kepada pemberian antigen tunggal, antibodi terbentuk yang berbeza dalam pertalian untuk antigen, penentu antigen, berat molekul, mobiliti elektroforetik, dan asid amino terminal-N. Antibodi kumpulan terhadap pelbagai mikroba menyebabkan tindak balas silang terhadap pelbagai jenis dan jenis salmonella, shigella, Escherichia, protein haiwan, polisakarida. Antibodi yang dihasilkan adalah heterogen dalam kekhususannya berkenaan dengan antigen homogen atau penentu antigenik tunggal. Heterogenitas antibodi dicatat tidak hanya terhadap antigen protein dan polisakarida, tetapi juga terhadap kompleks, termasuk konjugasi, antigen dan melawan haptens. Adalah dipercayai bahawa heterogenitas antibodi ditentukan oleh mikroheterogenitas penentu antigen yang diketahui. Heterogenitas dapat disebabkan oleh pembentukan antibodi ke kompleks antigen-antibodi, yang diperhatikan semasa imunisasi berulang, perbezaan sel yang membentuk antibodi, dan juga kepunyaan antibodi terhadap kelas imunoglobulin yang berlainan, yang, seperti protein lain, mempunyai struktur antigenik yang dikendalikan secara genetik yang kompleks.

Jenis antibodi

Antibodi lengkap mempunyai sekurang-kurangnya dua pusat aktif dan, apabila digabungkan dengan antigen in vitro, menyebabkan reaksi yang dapat dilihat: penyatuan, pemendakan, pengikat pelengkap; meneutralkan toksin, virus, bakteria opsonize, menyebabkan fenomena visual lekatan imun, imobilisasi, pembengkakan kapsul, beban platelet. Reaksi berlanjutan dalam dua fasa: spesifik (interaksi antibodi dengan antigen) dan tidak spesifik (satu atau yang lain dari fenomena di atas). Umumnya diakui bahawa pelbagai reaksi serologi ditentukan oleh satu, bukan sebilangan besar antibodi, dan bergantung pada teknik formulasi. Terdapat antibodi lengkap termal yang bertindak balas dengan antigen pada t ° 37 °, dan sejuk (cryophilic), yang menunjukkan kesan pada t ° di bawah 37 °. Terdapat juga antibodi yang bertindak balas dengan antigen pada suhu rendah, dan kesan yang dapat dilihat ditunjukkan pada t ° 37 °; ini adalah antibodi biphasic, biothermal, yang ditetapkan oleh hemolysin Donat - Landsteiner. Semua kelas imunoglobulin yang diketahui mengandungi antibodi lengkap. Aktiviti dan kekhususan mereka ditentukan oleh titer, aviditi (lihat Aviditi), dan jumlah antideterminant. Antibodi IgM lebih aktif daripada antibodi IgG dalam reaksi hemolisis dan aglutinasi.

Antibodi yang tidak lengkap (tidak mendakan, menyekat, agglutinoid), seperti antibodi lengkap, mampu mengikat antigen yang sesuai, tetapi reaksi tidak disertai dengan fenomena pemendakan, pengagregatan, dll., Yang dilihat secara in vitro.

Antibodi tidak lengkap dijumpai pada manusia pada tahun 1944 terhadap antigen Rh, mereka dijumpai dalam jangkitan virus, rickettsial dan bakteria berkaitan dengan toksin dalam pelbagai keadaan patologi. Terdapat beberapa bukti bivalen antibodi yang tidak lengkap. Antibodi tidak lengkap bakteria mempunyai sifat pelindung: antitoksik, opsonis, bakteriologi; pada masa yang sama, antibodi tidak lengkap ditemukan dalam sejumlah proses autoimun - dengan penyakit darah, terutama anemia hemolitik.

Hetero-, iso- dan autoantibodi yang tidak lengkap boleh menyebabkan kerosakan sel, dan juga berperanan dalam berlakunya leuko- dan trombositopenia akibat ubat

Antibodi yang biasa dijumpai dalam serum darah haiwan dan manusia sekiranya tiada jangkitan atau imunisasi yang jelas dianggap antibodi normal (semula jadi). Asal-usul antibodi normal antibakteria dapat dikaitkan, khususnya, dengan rangsangan antigenik mikroflora normal badan. Pandangan ini secara teori dan eksperimen dibuktikan oleh kajian mengenai haiwan gnotobion dan bayi baru lahir dalam keadaan hidup normal. Persoalan mengenai fungsi antibodi normal secara langsung berkaitan dengan kekhususan tindakannya. L. A. Zilber (1958) percaya bahawa ketahanan individu terhadap jangkitan dan, sebagai tambahan, "kesediaan imunogenik tubuh" ditentukan oleh kehadirannya. Peranan antibodi normal dalam aktiviti bakteria darah, dalam opsonisasi semasa fagositosis ditunjukkan. Hasil kajian banyak penyelidik menunjukkan bahawa antibodi normal terutamanya makroglobulin - IgM. Beberapa penyelidik telah menemui antibodi normal dalam kelas imunoglobulin IgA dan IgG. Mereka boleh mengandungi antibodi yang tidak lengkap atau lengkap (antibodi normal terhadap sel darah merah - lihat Kumpulan Darah).

Sintesis antibodi

Sintesis antibodi berlangsung dalam dua fasa. Fasa pertama adalah induktif, pendam (1-4 hari), di mana antibodi dan sel pembentuk antibodi tidak dikesan; fasa kedua adalah produktif (bermula selepas fasa induktif), antibodi dijumpai dalam sel plasma dan cecair yang mengalir dari organ limfoid. Selepas fasa pertama pembentukan antibodi, kadar pertumbuhan antibodi yang sangat cepat bermula, selalunya kandungannya dapat berlipat ganda setiap 8 jam atau bahkan lebih cepat. Kepekatan maksimum pelbagai antibodi dalam serum darah selepas satu imunisasi dicatatkan pada hari ke-5, ke-7, ke-10 atau ke-15; selepas suntikan antigen yang disimpan - pada hari ke-21-30 atau ke-45. Kemudian setelah 1-3 bulan atau lebih, titer antibodi turun dengan mendadak. Walau bagaimanapun, kadang-kadang tahap antibodi yang rendah selepas imunisasi dicatat dalam darah selama beberapa tahun. Didapati bahawa imunisasi primer dengan sebilangan besar antigen yang berlainan disertai dengan kemunculan antibodi IgM (19S) pada mulanya, kemudian untuk jangka waktu yang pendek - antibodi IgM dan IgG (7S) dan, akhirnya, antibodi 7S ringan sahaja. Rangsangan berulang organisma peka dengan antigen mempercepat pembentukan kedua kelas antibodi, memendekkan fasa laten pembentukan antibodi, masa sintesis antibodi 19S dan mempromosikan sintesis keutamaan antibodi 7S. Selalunya antibodi 19S tidak muncul sama sekali.

Perbezaan ketara antara fasa induktif dan produktif pembentukan antibodi dijumpai ketika mempelajari kepekaan mereka terhadap sejumlah pengaruh, yang sangat penting untuk memahami sifat profilaksis tertentu. Sebagai contoh, diketahui bahawa pendedahan sebelum penundaan imunisasi atau sepenuhnya menghalang pembentukan antibodi. Penyinaran dalam fasa pembiakan pembentukan antibodi tidak mempengaruhi kandungan antibodi dalam darah.

Pengasingan dan pemurnian antibodi

Untuk meningkatkan kaedah pengasingan dan pemurnian antibodi, imunosorben telah dicadangkan. Kaedah ini didasarkan pada penukaran antigen larut menjadi tidak larut dengan melampirkannya melalui ikatan kovalen ke pangkalan tidak larut dari selulosa, Sephadex atau polimer lain. Kaedah ini memungkinkan untuk mendapatkan antibodi yang sangat disucikan dalam kuantiti yang banyak. Proses pengasingan antibodi menggunakan imunosorben merangkumi tiga peringkat:

1) pengambilan antibodi dari serum imun;

2) mencuci imunosorben dari protein tidak spesifik;

3) pembelahan antibodi dari imunosorben yang dicuci (biasanya dengan larutan penyangga dengan nilai pH rendah). Sebagai tambahan kepada kaedah ini, kaedah lain untuk membersihkan antibodi juga diketahui. Mereka boleh dibahagikan kepada dua kumpulan: spesifik dan tidak spesifik. Yang pertama didasarkan pada pemisahan antibodi dari kompleks antigen yang tidak larut - antibodi (endapan, aglutinat). Ia dijalankan oleh pelbagai bahan; kaedah pencernaan antigen antigen atau toksin flokulat yang meluas - antitoksin amilase, trypsin, pepsin. Elusi termal juga digunakan pada suhu 37–56 °.

Kaedah tidak spesifik untuk pemurnian antibodi berdasarkan pengasingan globulin gamma: elektroforesis gel, kromatografi pada resin pertukaran ion, fraksinasi dengan penyaringan gel melalui Sephadex. Kaedah pemendakan dengan natrium sulfat atau amonium banyak diketahui. Kaedah ini boleh digunakan dalam kes kepekatan tinggi antibodi dalam serum, misalnya, dengan hiperimunisasi..

Penapisan gel melalui Sephadex, serta penggunaan resin pertukaran ion, memungkinkan pemisahan antibodi dengan ukuran molekulnya.

Penggunaan antibodi

Antibodi, terutama gamma globulin, digunakan untuk rawatan dan pencegahan difteria, campak, tetanus, gangren gas, antraks, leptospirosis, terhadap staphylococci, rabies, influenza, dan lain-lain. Sera diagnostik yang disiapkan dan dimurnikan khas digunakan dalam pengenalpastian serologi patogen (lihat Pengenalan mikrob). Didapati bahawa pneumococci, staphylococci, salmonella, bacteriophages, dll., Menyerap antibodi yang sesuai, mematuhi platelet, sel darah merah dan zarah asing yang lain. Fenomena ini dipanggil ketahanan badan. Telah ditunjukkan bahawa reseptor protein platelet dan eritrosit, yang dihancurkan oleh trypsin, papain, dan formalin, berperanan dalam mekanisme fenomena ini. Reaksi kepatuhan imun bergantung pada suhu. Ini diambil kira oleh kepatuhan antigen korpuskular atau oleh hemagglutination kerana antigen larut dengan adanya antibodi dan pelengkap. Reaksi sangat sensitif dan dapat digunakan untuk menentukan pelengkap dan jumlah antibodi yang sangat kecil (0,005-0,01 μg nitrogen). Lekatan imun meningkatkan fagositosis leukosit.

Teori moden pembentukan antibodi

Terdapat teori instruktif pembentukan antibodi, menurut Crimea antigen terlibat secara langsung atau tidak langsung dalam pembentukan imunoglobulin spesifik, dan teori yang melibatkan pembentukan antibodi yang sudah ada secara genetik terhadap semua kemungkinan antigen atau sel yang mensintesis antibodi ini. Ini termasuk teori pemilihan dan teori penindasan - derepresi, yang memungkinkan sintesis sebarang antibodi oleh satu sel. Teori juga diusulkan yang bertujuan untuk memahami proses tindak balas imunologi pada tahap keseluruhan organisma, dengan mengambil kira interaksi pelbagai sel dan idea yang diterima umum mengenai sintesis protein dalam tubuh..

Teori matriks Gaurowitz-Pauling langsung mengurangkan fakta bahawa antigen, memasuki sel yang menghasilkan antibodi, berperanan sebagai matriks yang mempengaruhi pembentukan molekul imunoglobulin dari rantai peptida, sintesisnya berjalan tanpa penyertaan antigen. “Intervensi” antigen berlaku hanya pada fasa kedua pembentukan molekul protein - fasa memutar rantai peptida. Antigen mengubah asid N-amino terminal antibodi masa depan (imunoglobulin atau rantai peptida individu) sehingga menjadi pelengkap kepada penentu antigen dan mudah bersentuhan dengannya. Antibodi yang terbentuk dibelah dari antigen, memasuki aliran darah, dan antigen yang dilepaskan mengambil bahagian dalam pembentukan molekul antibodi baru. Teori ini telah menimbulkan sejumlah penolakan serius. Ia tidak dapat menjelaskan pembentukan toleransi imunologi; jumlah antibodi yang unggul yang dihasilkan oleh sel per unit masa dengan bilangan molekul antigen berkali-kali lebih kecil di dalamnya; jangka masa penghasilan antibodi oleh tubuh, yang dihitung selama bertahun-tahun atau sepanjang hayat, dibandingkan dengan tempoh pengekalan antigen yang lebih pendek dalam sel, dan lain-lain. Ia juga harus diambil kira bahawa sel-sel plasma atau limfoid yang menghasilkan antibodi tidak mengasimilasi antigen, walaupun terdapat antigen asli atau serpihan dalam sel mensintesis antibodi tidak dapat dikecualikan sepenuhnya. Baru-baru ini, Gaurowitz (F. Haurowitz, 1965) mengusulkan konsep baru, yang mana antigen berubah bukan hanya sekunder, tetapi juga struktur utama imunoglobulin.

Teori matriks tidak langsung Burnet - Fenner mendapat kemasyhuran pada tahun 1949. Penulisnya percaya bahawa makromolekul antigen dan kemungkinan besar penentunya meresap ke dalam nukleus sel-sel kuman dan menyebabkan perubahan tetap di dalamnya, yang hasilnya adalah pembentukan antibodi terhadap antigen ini. Analogi dibenarkan antara proses yang dijelaskan dan transduksi bakteria. Kualiti baru pembentukan globulin imun yang diperoleh oleh sel dihantar ke keturunan sel dalam beberapa generasi. Walau bagaimanapun, persoalan peranan antigen dalam proses yang dijelaskan kontroversial..

Keadaan inilah yang menyebabkan teori pemilihan semula jadi Erne (K. Jerne, 1955).

Teori pemilihan semula jadi Erne. Menurut teori ini, antigen bukan matriks untuk sintesis antibodi dan tidak menyebabkan perubahan genetik dalam sel penghasil antibodi. Peranannya dikurangkan kepada pemilihan antibodi "normal" yang ada yang berlaku secara spontan kepada pelbagai antigen. Ini berlaku seolah-olah: antigen, setelah masuk ke dalam badan, menemui antibodi yang sesuai, bergabung dengannya; kompleks antigen-antibodi yang dihasilkan diserap oleh sel-sel yang menghasilkan antibodi, dan yang terakhir mendapat insentif untuk menghasilkan antibodi seperti ini.

Teori pemilihan klonal Burnet (F. Burnet) adalah pengembangan lebih lanjut mengenai idea pemilihan Erne, tetapi bukan mengenai antibodi, tetapi sel yang menghasilkan antibodi. Burnet percaya bahawa sebagai hasil daripada proses pembezaan umum dalam tempoh embrio dan selepas bersalin, banyak klon sel-sel limfoid atau kompeten imunologi terbentuk dari sel mesenchymal yang dapat bertindak balas dengan pelbagai antigen atau penentu mereka dan menghasilkan antibodi - imunoglobulin. Sifat tindak balas sel limfoid terhadap antigen dalam tempoh embrio dan selepas bersalin adalah berbeza. Embrio sama sekali tidak menghasilkan globulin, atau mensintesisnya sedikit. Walau bagaimanapun, diasumsikan bahawa klon sel yang mampu bertindak balas dengan penentu antigenik protein mereka sendiri bertindak balas dengan mereka dan musnah akibat reaksi ini. Jadi, sel yang membentuk anti-A-aglutinin pada orang dengan kumpulan darah A dan anti-B-agglutinin pada orang dengan kumpulan darah B kemungkinan akan mati. Sekiranya anda memasukkan antigen ke dalam embrio, ia akan memusnahkan klon sel yang sesuai dengan cara yang sama. dan bayi yang baru lahir sepanjang hayat seterusnya secara teorinya akan toleran terhadap antigen ini. Proses memusnahkan semua klon sel ke protein embrio mereka sendiri berakhir pada saat kelahirannya atau keluar dari telur. Sekarang bayi yang baru lahir hanya memiliki "miliknya", dan dia mengenali "makhluk asing" yang masuk ke dalam tubuhnya. Burnet juga memungkinkan pemeliharaan klon sel "terlarang" yang mampu bertindak balas dengan autoantigen organ yang, semasa pengembangan, diasingkan dari sel yang menghasilkan antibodi. Pengiktirafan "alien" dijamin oleh klon sel mesenchymal yang tersisa, di permukaannya ada antideterminant yang sesuai (reseptor, antibodi selular), yang melengkapi penentu antigen "alien". Sifat reseptor ditentukan secara genetik, iaitu, dikodkan pada kromosom dan tidak dimasukkan ke dalam sel bersama dengan antigen. Kehadiran reseptor siap pasti menyebabkan reaksi klon sel ini dengan antigen ini, akibatnya sekarang adalah dua proses: pembentukan antibodi khusus - imunoglobulin dan pendaraban sel-sel klon ini. Burnet mengakui bahawa sel mesenchymal yang telah menerima rangsangan antigenik, dalam urutan mitosis, menimbulkan populasi sel anak perempuan. Sekiranya sel seperti itu telah menetap di medula kelenjar getah bening, ia menimbulkan pembentukan sel plasma, apabila ia menetap di folikel limfa - ke limfosit, di sumsum tulang - ke eosinofil. Sel anak perempuan terdedah kepada mutasi somatik yang tidak dapat dipulihkan. Semasa mengira keseluruhan organisma, jumlah sel bermutasi setiap hari boleh menjadi 100 000 atau 10 juta, dan, oleh itu, mutasi akan memberikan klon sel kepada antigen apa pun. Teori Burnet menimbulkan minat yang besar di kalangan penyelidik dan sebilangan besar eksperimen pengesahan. Bukti teori yang paling penting adalah bukti adanya reseptor imunoglobulin seperti antibodi pada pendahulunya sel penghasil antibodi (limfosit yang berasal dari sumsum tulang) dan adanya mekanisme pengecualian interkistronik dalam sel penghasil antibodi berhubung dengan antibodi dengan kekhususan yang berbeza.

Teori penindasan dan derepresi dirumuskan oleh L. Szilard pada tahun 1960. Menurut teori ini, setiap sel yang menghasilkan antibodi berpotensi mensintesis antibodi ke antigen apa pun, tetapi proses ini dihambat oleh penindas enzim yang terlibat dalam sintesis imunoglobulin. Pada gilirannya, pembentukan penindas dapat dihambat oleh pengaruh antigen. Sylard percaya bahawa pembentukan antibodi dikawal oleh gen yang tidak mudah dicerna. Jumlah mereka mencapai 10,000 untuk setiap satu set kromosom (haploid).

Lederberg (J. Lederberg) percaya bahawa dalam gen yang bertanggungjawab untuk sintesis globulin, terdapat laman web yang mengawal pembentukan pusat aktif antibodi. Biasanya, fungsi laman web ini dihambat, dan oleh itu terdapat sintesis globulin normal. Di bawah pengaruh antigen, dan juga, mungkin, di bawah pengaruh hormon tertentu, laman gen yang bertanggungjawab untuk pembentukan pusat aktif antibodi disekat dan dirangsang, dan sel mula mensintesis globulin imun.

Menurut H. N. Zhukov-Verezhnikov (1972), pendahulu evolusi antibodi adalah enzim pelindung yang serupa dengan yang muncul dalam bakteria dengan ketahanan terhadap antibiotik yang diperoleh. Seperti antibodi, enzim terdiri daripada bahagian aktif (berkenaan dengan substrat) dan bahagian molekul pasif. Karena ekonominya, mekanisme "satu enzim - satu substrat" ​​telah digantikan oleh mekanisme "molekul tunggal dengan bahagian yang berubah-ubah," iaitu antibodi dengan pusat aktif yang berubah-ubah. Maklumat mengenai pembentukan antibodi dilaksanakan di zona "gen cadangan", atau di "zona redundansi" pada DNA. Kelebihan seperti itu, nampaknya, dapat dilokalisasi dalam DNA nuklear atau plasmid, yang menyimpan "maklumat evolusi. yang memainkan peranan mekanisme dalaman yang "merancang" kawalan kebolehubahan keturunan. " Hipotesis ini mengandungi komponen instruktif, tetapi tidak sepenuhnya instruktif..

P.F. Zdrodovsky menetapkan antigen sebagai peranan penekan gen tertentu yang mengawal sintesis antibodi pelengkap. Pada masa yang sama, antigen, seperti yang diakui oleh Zdrodovsky, sesuai dengan teori Selye, menjengkelkan adenohypophysis, yang mengakibatkan pengeluaran hormon pertumbuhan (STH) dan hormon adrenokortikotropik (ACTH). STH merangsang reaksi plasmacytic dan antibodi yang membentuk organ limfoid, yang seterusnya dirangsang oleh antigen, dan ACTH, yang bertindak pada korteks adrenal, menyebabkannya melepaskan kortison. Ini yang terakhir dalam sistem imun menghalang reaksi plasmacytic organ limfoid dan sintesis antibodi oleh sel. Semua peruntukan ini disahkan secara eksperimen..

Tindakan sistem kelenjar pituitari - adrenal pada penghasilan antibodi hanya dapat dikesan pada tubuh yang sebelumnya diimunisasi. Sistem inilah yang mengatur reaksi serologi anamnestic sebagai tindak balas kepada pengenalan pelbagai rangsangan tidak spesifik ke dalam tubuh.

Kajian mendalam mengenai perubahan selular dalam proses tindak balas imunologi dan pengumpulan sejumlah besar fakta baru membuktikan kedudukan bahawa tindak balas imunologi hanya dilakukan sebagai hasil interaksi sel tertentu. Selaras dengan ini, beberapa hipotesis dikemukakan..

1. Teori kerjasama dua sel. Banyak fakta telah terkumpul yang menunjukkan bahawa tindak balas imunologi dalam tubuh dilakukan dalam keadaan interaksi pelbagai jenis sel. Terdapat bukti bahawa makrofag adalah yang pertama untuk mengasimilasi dan memodifikasi antigen, tetapi sel-sel limfoid "diperintahkan" mengenai sintesis antibodi. Pada masa yang sama, telah ditunjukkan bahawa kerjasama juga berlaku antara limfosit yang tergolong dalam subpopulasi yang berlainan: antara T-limfosit (bergantung kepada timus, antenreaktif, yang berasal dari kelenjar timus) dan sel-B (bebas timus, pendahulu sel pembentuk antibodi, limfosit sumsum tulang).

2. Teori kerjasama tiga sel. Menurut pandangan Roitt (I. Roitt) dan lain-lain (1969), antigen ditangkap dan diproses oleh makrofag. Antigen seperti itu merangsang limfosit reaktif antigen yang mengalami transformasi menjadi sel blastoid, yang memberikan hipersensitiviti yang tertunda dan berubah menjadi sel memori imunologi yang lama. Sel-sel ini bekerjasama dengan sel-sel progenitor pembentuk antibodi, yang pada gilirannya membezakan dengan berkembang biak menjadi sel penghasil antibodi. Menurut Richter (M. Richter, 1969), kebanyakan antigen mempunyai pertalian yang lemah untuk sel pembentuk antibodi, oleh itu, interaksi proses berikut diperlukan untuk penghasilan antibodi: antigen + makrofag - antigen yang diproses + antigen-reaktif sel - antigen yang diaktifkan + pendahulu sel yang membentuk antibodi - antibodi. Sekiranya pertalian antigen tinggi, prosesnya akan seperti ini: antigen + pendahulu sel pembentuk antibodi - antibodi. Diasumsikan bahawa dalam keadaan rangsangan berulang dengan antigen, yang terakhir secara langsung bersentuhan dengan sel memori yang membentuk antibodi atau imunologi. Kedudukan ini disahkan oleh rintangan jarak yang lebih besar dari tindak balas imunologi berulang daripada yang utama, yang dijelaskan oleh rintangan sel yang berbeza yang mengambil bahagian dalam tindak balas imunologi. Mengemukakan perlunya kerjasama tiga sel dalam genesis antibodi, R.V. Petrov (1969, 1970) percaya bahawa sintesis antibodi akan berlaku hanya jika sel induk (pendahulu sel pembentuk antibodi) secara serentak menerima antigen yang diproses dari makrofag dan pemicu imunopoiesis dari sel antigen-reaktif, terbentuk setelah rangsangan (antigen-reactive cell) oleh antigen. Sekiranya sel induk hanya bersentuhan dengan antigen yang diproses oleh makrofag, toleransi imunologi akan dibuat (lihat Toleransi imunologi). Sekiranya terdapat hubungan antara sel induk dan sel antigen-reaktif sahaja, maka imunoglobulin bukan spesifik disintesis. Diandaikan bahawa mekanisme ini mendasari ketidakaktifan sel induk yang tidak diketahui oleh limfosit, kerana pemicu imunopoiesis, memasuki sel stem alogenik, adalah antimetabolit untuknya (sel-sel syngeneik adalah sel-sel dengan genom yang sama, sel-sel alogenik adalah jenis yang sama, dengan komposisi genetik yang berbeza).

Antibodi alahan

Antibodi alergi adalah imunoglobulin spesifik yang dihasilkan oleh tindakan alergen pada manusia dan haiwan. Ini merujuk kepada antibodi yang beredar di dalam darah sekiranya berlaku reaksi alergi jenis segera. Terdapat tiga jenis antibodi alergi utama: pemekaan kulit, atau reagen; menyekat dan hemagglutinating. Ciri biologi, kimia dan fizikokimia antibodi alahan seseorang adalah pelik (tab.).

Sifat-sifat ini berbeza dengan ketara dari sifat-sifat mendakan, antibodi pengikat pelengkap, aglutinin, dan lain-lain yang dijelaskan dalam imunologi.

Reagen biasanya digunakan untuk menunjukkan antibodi pemekaan kulit manusia yang homolog. Ini adalah jenis antibodi manusia alergi yang paling penting, sifat utamanya adalah keupayaan untuk melakukan reaksi pasif peningkatan kepekaan terhadap kulit penerima yang sihat (lihat reaksi Prausnitz-Kustner). Reagen mempunyai sebilangan sifat ciri yang membezakannya dengan antibodi imun yang cukup dipelajari. Bagaimanapun, banyak persoalan mengenai sifat reagen dan sifat imunologi mereka masih belum dapat diselesaikan. Secara khusus, masalah yang tidak dapat diselesaikan adalah homogenitas atau heterogenitas reagen dalam arti kepunyaan mereka dalam kelas imunoglobulin tertentu.

Memblokir antibodi berlaku pada pesakit dengan pollinosis dalam proses terapi hiposensitisasi spesifik terhadap antigen yang dilakukan dengan hiposensitisasi. Sifat antibodi jenis ini menyerupai antibodi pemendapan..

Antibodi hemaglutinasi biasanya difahami sebagai antibodi serum manusia dan haiwan yang mampu secara khusus menggabungkan sel darah merah yang digabungkan dengan alergen serbuk sari (reaksi tidak langsung, atau pasif, hemaglutinasi). Pengikatan permukaan sel darah merah ke alergen debunga dicapai dengan pelbagai kaedah, misalnya, menggunakan tanin, formalin, benzidin dua kali diazot. Antibodi hemaglutinasi dapat dijumpai pada orang dengan hipersensitiviti terhadap debunga tumbuhan, baik sebelum dan sesudah terapi hiposensitisasi tertentu. Semasa terapi ini, transformasi reaksi negatif menjadi positif atau peningkatan titisan reaksi hemaglutinasi berlaku. Antibodi hemaglutinasi mempunyai sifat terserap lebih cepat pada sel darah merah yang dirawat dengan alergen debunga, terutama sebahagian pecahannya. Imunosorben menghilangkan antibodi hemagglutinating lebih cepat daripada reagen. Kegiatan hemaglutinasi juga terkait dengan beberapa tahap dengan antibodi sensitif kulit, bagaimanapun, peranan antibodi sensitif kulit dalam hemaglutinasi nampaknya kecil, kerana tidak ada hubungan antara antibodi sensitif kulit dan hemagglutinating. Sebaliknya, terdapat hubungan antara hemagglutinating dan blocking antibodi, baik pada individu yang alah terhadap debunga tumbuhan dan pada individu yang sihat yang diimunisasi dengan debunga tumbuhan. Kedua-dua jenis antibodi ini mempunyai banyak sifat yang serupa. Dalam proses terapi hiposensitisasi tertentu, peningkatan tahap kedua-duanya dan jenis antibodi lain berlaku. Antibodi hemaglutinasi terhadap penisilin tidak serupa dengan antibodi yang memekatkan kulit. Sebab utama pembentukan antibodi hemagglutinating adalah terapi penisilin. Ternyata, antibodi hemaglutinasi harus diberikan kepada kelompok antibodi yang disebut oleh beberapa penulis sebagai "saksi antibodi".

Pada tahun 1962, Shelley (W. Shelley) mencadangkan ujian diagnostik khas berdasarkan apa yang disebut degranulasi leukosit basofilik darah arnab di bawah pengaruh reaksi alergen dengan antibodi tertentu. Walau bagaimanapun, sifat antibodi yang mengambil bahagian dalam reaksi ini dan hubungannya dengan reagen yang beredar tidak dapat dipahami dengan baik, walaupun ada bukti korelasi jenis antibodi ini dengan tahap reagen pada pasien dengan pollinosis.

Penentuan nisbah alergen dan serum ujian yang optimum sangat penting dari segi praktikal, terutamanya dalam kajian dengan jenis alergen, maklumat yang belum terdapat dalam literatur yang berkaitan.

Jenis antibodi berikut boleh dikaitkan dengan antibodi alahan haiwan: 1) antibodi dalam anafilaksis eksperimen; 2) antibodi pada penyakit alahan haiwan secara spontan; 3) antibodi yang berperanan dalam perkembangan reaksi Arthus (seperti mendakan). Semasa anafilaksis eksperimen, baik umum dan tempatan, jenis antibodi anafilaksis khas dengan sifat sensitif secara pasif pada kulit haiwan dari spesies yang sama terdapat dalam darah haiwan.

Telah ditunjukkan bahawa pemekaan anafilaksis babi guinea dengan alergen debunga padang rumput dari debunga padang rumput disertai dengan peredaran antibodi sensitif kulit dalam darah.Badan sensitif kulit ini mempunyai kemampuan untuk melakukan pemekaan kulit pasif homolog in vivo. Bersama dengan antibodi sensitif kulit yang homolog ini, secara umum pemekaan babi guinea dengan alergen dari debunga padang rumput, antibodi yang dikesan oleh hemaglutinasi pasif dengan benzidin bis-diazotisasi beredar di dalam darah. Antibodi sensitif kulit yang melakukan pemindahan pasif homolog dan mempunyai korelasi positif dengan anafilaksis diklasifikasikan sebagai antibodi anafilaksis homologis, atau antibodi homositopropik. Dengan menggunakan istilah "antibodi anafilaksis", penulis mengaitkannya sebagai peranan utama dalam reaksi anafilaksis. Kajian mula muncul yang mengesahkan adanya antibodi homositopropik terhadap antigen protein dan konjugat dalam pelbagai jenis haiwan eksperimen. Beberapa pengarang mengenal pasti tiga jenis antibodi yang terlibat dalam reaksi alahan dari jenis terdekat. Ini adalah antibodi yang berkaitan dengan jenis baru imunoglobulin (IgE) pada manusia dan antibodi serupa pada monyet, anjing, arnab, tikus, tikus. Jenis antibodi kedua adalah antibodi jenis babi guinea, yang dapat diperbaiki pada sel mast dan tisu isologous. Mereka berbeza dalam sebilangan sifat, khususnya, ia lebih termostabil. Dipercayai bahawa antibodi jenis IgG juga boleh menjadi jenis antibodi anafilaksis kedua pada manusia. Jenis ketiga adalah antibodi yang mensensitifkan tisu heterologi yang dimiliki, misalnya, babi guinea di kelas γ2. Pada manusia, hanya antibodi IgG yang mempunyai kemampuan untuk memekatkan kulit babi guinea.

Dalam penyakit haiwan, antibodi alahan akibat reaksi alergi spontan dijelaskan. Antibodi ini bersifat termolabile dan mempunyai sifat sensitif pada kulit..

Antibodi yang tidak lengkap digunakan dalam bidang perubatan ketika menentukan antigen sejumlah sistem isoserologi (lihat Kumpulan darah) untuk menentukan darah milik orang tertentu dalam kes kesalahan jenayah (pembunuhan, kesalahan seksual, kemalangan jalan raya, kecederaan badan, dll.), Serta pemeriksaan terhadap ayah dan ibu yang dipertikaikan. Tidak seperti antibodi penuh, ia tidak menyebabkan pengagregatan sel darah merah dalam garam. Antaranya, dua jenis antibodi dibezakan. Yang pertama daripadanya adalah agglutinoids. Antibodi ini dapat menyebabkan sel darah merah melekat bersama dalam persekitaran protein atau makromolekul. Jenis antibodi kedua adalah cryptagglutinoids, yang bertindak balas dalam ujian Coombs tidak langsung dengan serum antihammaglobulin.

Untuk bekerja dengan antibodi yang tidak lengkap, sejumlah kaedah telah dicadangkan, yang dibahagikan kepada tiga kumpulan utama.

1. Kaedah konglomerasi. Telah diperhatikan bahawa antibodi yang tidak lengkap mampu menyebabkan penyatuan sel darah merah dalam protein atau medium makromolekul. Sebagai media seperti itu, gunakan serum AB (tidak mengandungi antibodi), albumin sapi, dextran, biogel - gelatin yang disucikan khas, dibawa ke pH neutral dengan larutan penyangga, dan lain-lain (lihat. Konglutinasi).

2. Kaedah enzimatik. Antibodi yang tidak lengkap dapat menggabungkan sel darah merah yang sebelumnya telah dirawat dengan enzim tertentu. Untuk pemprosesan seperti itu, trypsin, ficin, papain, ekstrak dari ragi roti, protelin, bromelin, dan lain-lain digunakan..

3. Uji Coombs dengan serum antiglobulin (lihat reaksi Coombs).

Antibodi yang tidak lengkap yang berkaitan dengan agglutinoid dapat memberikan kesannya pada ketiga-tiga kumpulan kaedah. Antibodi yang berkaitan dengan cryptagglutinoids tidak dapat mengagregat sel darah merah tidak hanya dalam garam, tetapi juga dalam medium makromolekul, dan juga menyekatnya pada yang terakhir. Antibodi ini hanya dijumpai dalam ujian Coombs tidak langsung, dengan bantuan yang bukan sahaja antibodi yang berkaitan dengan cryptagglutinoids ditemui, tetapi juga antibodi yang merupakan agglutinoid.

Antibodi monoklonal

Dari Bahan Tambahan, Jilid 29

Cara klasik menghasilkan antibodi untuk tujuan diagnostik dan penyelidikan adalah dengan mengimunisasi haiwan dengan antigen tertentu dan seterusnya memperoleh sera imun yang mengandungi antibodi dengan kekhususan yang diperlukan. Kaedah ini mempunyai sejumlah kelemahan, yang berkaitan terutamanya dengan fakta bahawa sera imun merangkumi populasi antibodi heterogen dan heterogen yang berbeza dalam aktiviti, pertalian (pertalian untuk antigen) dan kesan biologi. Sera imun konvensional mengandungi campuran antibodi khusus untuk antigen tertentu dan molekul protein yang mencemarkannya. Antibodi monoklonal yang diterima melalui klon sel hibrida - hibridoma mewakili jenis reagen imunologi baru (lihat). Kelebihan antibodi monoklonal yang tidak diragukan adalah standard genetiknya, kebolehulangan tanpa had, kepekaan dan kekhususan yang tinggi. Hibridoma pertama diasingkan pada awal 70-an abad ke-20, namun, perkembangan sebenar teknologi yang berkesan untuk membuat antibodi monoklonal dikaitkan dengan kajian Köhler dan Milypteyn (G. Kohler, S. Milstein), hasilnya diterbitkan pada tahun 1975-1976. Pada dekad berikutnya, arah baru dalam bidang kejuruteraan sel yang berkaitan dengan pengeluaran antibodi monoklonal dikembangkan lebih lanjut..

Hibridoma terbentuk oleh penyatuan limfosit haiwan hiperimunisasi dengan sel yang ditransplantasikan oleh pelbagai jenis asal. Hibridoma mewarisi dari salah satu ibu bapa kemampuan untuk menghasilkan imunoglobulin tertentu, dan dari yang kedua, kemampuan untuk menghasilkan semula tanpa had. Populasi sel hibrid yang diklon dapat menghasilkan imunoglobulin homogen secara genetik dengan kekhususan tertentu untuk jangka masa yang panjang - antibodi monoklonal. Antibodi monoklonal yang paling banyak digunakan dihasilkan oleh hybridoma yang diperoleh menggunakan garis sel tikus unik MORS 21 (RE).

Masalah yang tidak dapat diatasi dari teknologi antibodi monoklonal merangkumi kerumitan dan kerumitan memperoleh klon hibrida yang sangat produktif yang menghasilkan imunoglobulin monospesifik; kesukaran mendapatkan hibridoma menghasilkan antibodi monoklonal kepada antigen lemah yang tidak dapat mendorong pembentukan limfosit B yang terangsang dalam jumlah yang mencukupi; kekurangan sifat tertentu dari sera imun dalam antibodi monoklonal, misalnya, keupayaan untuk membentuk endapan dengan kompleks antibodi dan antigen lain, di mana banyak sistem ujian diagnostik didasarkan; frekuensi peleburan limfosit yang rendah menghasilkan antibodi dengan sel myeloma dan kestabilan terhad hibridoma dalam kultur jisim; kestabilan rendah semasa penyimpanan dan peningkatan kepekaan persediaan antibodi monoklonal terhadap perubahan pH, suhu inkubasi, serta pembekuan, pencairan dan pendedahan kepada faktor kimia; kesukaran mendapatkan hibridoma atau pemindahan transplantasi antibodi monoklonal manusia.

Hampir semua sel dalam populasi hybridoma yang diklon menghasilkan antibodi monoklonal kelas yang sama dan subkelas imunoglobulin. Antibodi monoklonal dapat diubahsuai menggunakan kaedah kejuruteraan imun selular. Oleh itu, adalah mungkin untuk mendapatkan "triomes" dan "quadroms" yang menghasilkan antibodi monoklonal dengan kekhususan yang ditentukan sebelumnya, mengubah pengeluaran IgM sitotoksik pentamerik kepada pengeluaran IgM bukan sitotoksik pentamerik, IgM bukan sitotoksik monomerik atau IgM dengan pertalian yang berkurang, dan juga beralih (sambil mengekalkan kekhususan antigenik) Rembesan IgM ke rembesan IgD, dan rembesan IgG ke rembesan IgG2a, IgG2b atau IgA.

Genom tikus memberikan sintesis lebih dari 1 * 10 7 varian antibodi yang berbeza yang secara khusus berinteraksi dengan epitop (antigenik penentu) protein, karbohidrat atau antigen lipid yang terdapat dalam sel atau mikroorganisma. Pembentukan ribuan antibodi yang berbeza terhadap satu antigen, yang berbeza dalam kekhususan dan pertalian, adalah mungkin; sebagai contoh, imunisasi dengan sel manusia yang homogen menyebabkan hingga 50,000 antibodi yang berbeza. Menggunakan kacukan membolehkan anda memilih hampir semua varian antibodi monoklonal yang dapat disebabkan oleh antigen ini dalam tubuh haiwan eksperimen.

Kepelbagaian antibodi monoklonal yang diperoleh daripada protein (antigen) yang sama memerlukan penentuan kekhususannya yang lebih baik. Pencirian dan pemilihan imunoglobulin dengan sifat yang diperlukan di antara banyak jenis antibodi monoklonal yang berinteraksi dengan antigen yang dikaji sering berubah menjadi kerja eksperimen yang lebih intensif buruh daripada mendapatkan antibodi monoklonal. Kajian-kajian ini merangkumi pemisahan kumpulan antibodi ke dalam kumpulan yang khusus untuk epitop tertentu, diikuti dengan pemilihan pada setiap kumpulan pilihan terbaik untuk pertalian, kestabilan, dan parameter lain. Untuk menentukan kekhususan epitop, kaedah immunoassay enzim kompetitif paling kerap digunakan..

Dianggarkan bahawa urutan utama 4 asid amino (ukuran epitop biasa) boleh berlaku hingga 15 kali dalam urutan asid amino molekul protein. Walau bagaimanapun, tindak balas silang dengan antibodi monoklonal diperhatikan pada frekuensi yang jauh lebih rendah daripada yang diharapkan dari pengiraan ini. Ini berlaku kerana jauh dari semua laman web ini dinyatakan di permukaan molekul protein dan dikenali oleh antibodi. Sebagai tambahan, antibodi monoklonal mengesan urutan asid amino hanya dalam konformasi tertentu. Perlu diingat bahawa urutan asid amino dalam molekul protein tidak diedarkan secara statistik, dan laman pengikat antibodi jauh lebih besar daripada epitop minimum yang mengandungi 4 asid amino.

Penggunaan antibodi monoklonal telah membuka peluang yang tidak dapat diakses sebelumnya untuk mempelajari mekanisme aktiviti fungsional imunoglobulin. Buat pertama kalinya menggunakan antibodi monoklonal, adalah mungkin untuk mengenal pasti perbezaan antigen dalam protein yang sebelumnya tidak dapat dibezakan secara serologi. Perbezaan subtipe dan ketegangan baru antara virus dan bakteria dibuat, dan antigen selular baru ditemui. Dengan menggunakan antibodi monoklonal, dijumpai ikatan antigen antara struktur, yang keberadaannya tidak dapat dibuktikan dengan pasti menggunakan sera poliklonal (kebal konvensional). Penggunaan antibodi monoklonal memungkinkan untuk mengenal pasti penentu antigenik virus dan bakteria yang konservatif dengan kekhususan kumpulan luas, serta epitop spesifik strain dengan kebolehubahan dan kebolehubahan yang besar..

Yang penting adalah pengesanan penentu antigen menggunakan antibodi monoklonal, yang mendorong penghasilan antibodi pelindung dan peneutralan terhadap agen berjangkit, yang penting untuk pengembangan ubat terapi dan profilaksis. Interaksi antibodi monoklonal dengan epitop yang sesuai boleh menyebabkan halangan sterik (spatial) untuk manifestasi aktiviti fungsional molekul protein, serta perubahan alosterik yang mengubah konformasi bahagian aktif molekul dan menyekat aktiviti biologi protein.

Hanya dengan bantuan antibodi monoklonal adalah mungkin untuk mengkaji mekanisme tindakan koperasi imunoglobulin, saling berpotensi atau saling menghambat antibodi yang ditujukan kepada pelbagai epitop protein yang sama.

Untuk penghasilan sejumlah besar antibodi monoklonal, tumor tikus asites lebih kerap digunakan. Persediaan murni antibodi monoklonal dapat diperoleh pada media bebas serum dalam kultur suspensi yang dapat ditapai atau dalam sistem dialisis, dalam kultur mikroenkapsulasi dan alat seperti kultur kapilari. Untuk mendapatkan 1 g antibodi monoklonal, diperlukan kira-kira 0,5 l cecair ascitic atau 30 l cairan kultur yang diinkubasi dalam fermenter dengan sel hibridoma tertentu. Dalam keadaan pengeluaran, sejumlah besar antibodi monoklonal dihasilkan. Kos yang signifikan untuk pengeluaran antibodi monoklonal dibenarkan oleh kecekapan tinggi pemurnian protein pada antibodi monoklonal yang tidak bergerak, dan pekali pemurnian protein dalam prosedur kromatografi afiniti satu tahap mencapai beberapa ribu. Kromatografi afinitas berasaskan antibodi monoklonal digunakan untuk membersihkan hormon pertumbuhan, insulin, interferon, interleukin yang dihasilkan oleh strain bakteria, ragi, atau sel eukariotik yang diubah suai dengan kaedah kejuruteraan genetik.

Penggunaan antibodi monoklonal sebagai sebahagian daripada kit diagnostik berkembang pesat. Menjelang tahun 1984, kira-kira 60 sistem ujian diagnostik yang disediakan menggunakan antibodi monoklonal disyorkan untuk ujian klinikal di Amerika Syarikat. Tempat utama di antaranya diduduki oleh sistem ujian untuk diagnosis awal kehamilan, penentuan tahap hormon darah, vitamin, ubat-ubatan, diagnostik makmal penyakit berjangkit lain.

Kriteria pemilihan antibodi monoklonal untuk penggunaannya sebagai reagen diagnostik dirumuskan. Ini termasuk pertalian tinggi untuk antigen, yang memastikan pengikatan pada kepekatan antigen yang rendah, serta persaingan yang berkesan dengan antibodi organisma tuan rumah yang telah terikat dengan antigen dalam sampel ujian; orientasi terhadap laman antigen, biasanya tidak dikenali oleh antibodi organisma tuan rumah dan oleh itu tidak disamarkan oleh antibodi ini; orientasi terhadap penentu antigenik berulang dari struktur permukaan antigen yang didiagnosis; polyvalency memberikan aktiviti IgM yang lebih tinggi berbanding IgG.

Antibodi monoklonal dapat digunakan sebagai ubat diagnostik untuk penentuan hormon dan ubat, sebatian toksik, penanda tumor malignan, untuk klasifikasi dan pengiraan leukosit, penentuan gabungan kumpulan darah yang lebih tepat dan cepat, untuk mengesan antigen virus, bakteria, protozoa, untuk diagnosis penyakit autoimun, pengesanan autoantibodi, faktor reumatoid, penentuan kelas imunoglobulin dalam serum darah.

Antibodi monoklonal memungkinkan untuk berjaya membezakan struktur permukaan limfosit dan dengan ketepatan yang besar untuk mengenal pasti subpoyulasi utama limfosit dan mengklasifikasikannya kepada keluarga leukemia manusia dan sel limfoma. Reagen antibodi monoklonal baru memudahkan penentuan limfosit B dan T-limfosit, subkelompok T-limfosit, mengubahnya menjadi salah satu langkah mudah untuk mengira formula darah. Dengan bantuan antibodi monoklonal, satu atau lain-lain subpopulasi limfosit dapat dikeluarkan secara selektif, mematikan fungsi sistem imuniti selular yang sesuai.

Kaedah sedang dikembangkan untuk mengesan tumor dan metastasisnya di seluruh organisma dengan memperkenalkan isotop radioaktif yang diberi label dengan antibodi monoklonal khusus untuk antigen tumor. Keupayaan antibodi monoklonal yang dilabelkan dengan isotop radioaktif untuk mencari penentu antigenik yang unik membolehkan ukuran dan penyetempatan infarksi miokard ditentukan. Pendekatan ini dapat digunakan untuk mendiagnosis luka lain, termasuk asal berjangkit (termasuk proses parasit dan bakteria).

Biasanya, sediaan diagnostik berasaskan antibodi monoklonal mengandungi imunoglobulin yang dilabel dengan iodin radioaktif, peroksidase, atau enzim lain yang digunakan dalam reaksi imunoassay enzim, serta fluorokrom, seperti isotiosianat fluorescein, yang digunakan dalam kaedah imunofluoresensi. Kekhususan tinggi antibodi monoklonal sangat bernilai ketika membuat produk diagnostik yang lebih baik, meningkatkan kepekaan dan kekhususan radioimmunoassay, enzim immunoassay, kaedah imunofluoresensi analisis serologi, menaip antigen.

Penggunaan terapi antibodi monoklonal boleh berkesan sekiranya perlu untuk meneutralkan racun dari pelbagai asal, dan juga racun antigenaktif, untuk mencapai imunosupresi semasa pemindahan organ, untuk mendorong sitolisis sel tumor yang bergantung kepada pelengkap, untuk membetulkan komposisi T-limfosit dan imunoregulasi, untuk meneutralkan bakteria yang tahan terhadap antibiotik, imunisasi pasif terhadap virus patogen.

Halangan utama penggunaan terapi antibodi monoklonal adalah kemungkinan perkembangan tindak balas imunologi buruk yang berkaitan dengan asal-usul heterologi imunoglobulin monoklonal. Untuk mengatasinya, perlu mendapatkan antibodi monoklonal manusia. Kajian yang berjaya ke arah ini memungkinkan penggunaan antibodi monoklonal sebagai vektor untuk penyampaian ubat-ubatan yang terikat secara kovalen yang disasarkan.

Persediaan terapi khusus untuk sel dan tisu yang ditentukan dengan ketat dan dengan sitotoksisiti yang disasarkan sedang dikembangkan. Ini dicapai dengan konjugasi protein yang sangat toksik, seperti toksin difteria, dengan antibodi monoklonal yang mengenali sel sasaran. Diarahkan oleh antibodi monoklonal, agen kemoterapi mampu secara selektif memusnahkan sel-sel tumor di dalam tubuh yang membawa antigen tertentu. Antibodi monoklonal juga dapat bertindak sebagai vektor ketika dimasukkan ke dalam struktur permukaan liposom, yang memastikan pengiriman sejumlah besar ubat yang terkandung dalam liposom ke organ atau sel sasaran.

Penggunaan antibodi monoklonal secara konsisten bukan sahaja akan meningkatkan kandungan maklumat reaksi serologi biasa, tetapi juga mempersiapkan kemunculan pendekatan baru yang mendasar untuk kajian interaksi antigen dan antibodi.

Adalah Penting Untuk Menyedari Dystonia

Tentang Kami

Diagnosis hepatitis virus didasarkan terutamanya pada ujian darah. Bagaimanapun, jenis penyakit ini yang paling biasa, B dan C, disebarkan melalui hubungan langsung dengan cecair biologi ini.